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2020年48卷9期

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分析化学2020年第48卷第9期封面及目次
2020, 48(9): 0-0.
[摘要](276) [FullText PDF](25)
摘要:
评述与进展
C反应球蛋白分析方法的研究进展
唐铭擎 , 毛旭华 , 龚易昕悦 , 青琳森 , 谢静
2020, 48(9): 1121-1130. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201111
[摘要](383) [FullText PDF](68)
摘要:
C反应球蛋白(CRP)作为一种重要的急性炎症与感染性疾病相关生物标志物,临床上常被用于多种疾病的评估与病情监测。目前,CRP的临床检测方法主要有免疫比浊法、酶联免疫吸附比色法和侧向流免疫层析法等。近年来,随着分析理论和材料学研究的发展,生物传感技术、微流控技术等新的分析方法与技术不断涌现。本文综述了CRP的分析方法的开发与应用情况,重点评述了近五年的最新进展,展望了新型CRP检测方法的研究方向,以期为开发高灵敏度、高特异性、更能满足临床需求的CRP分析方法提供参考。
液体电极辉光放电在原子光谱分析中的研究和应用进展
冷安芹 , 林瑶 , 雍莉 , 郑成斌
2020, 48(9): 1131-1140. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201034
[摘要](311) [FullText PDF](48)
摘要:
液体电极辉光放电具有体积小、能耗低、电子密度高、操作简单方便等优点,在分析检测领域的应用发展迅速。本文从液体阴极辉光放电、液体阳极辉光放电以及交流驱动液体电极辉光放电角度,综述了近年来液体电极辉光放电微等离子体在原子光谱分析中应用的最新进展,重点阐述其在原子发射光谱激发、诱导化学蒸气发生以及与其它化学蒸气发生联用等领域的应用,并对其发展趋势进行了展望。
研究报告
基于阴离子交换策略的自供能生物传感平台超灵敏检测肝素
盖盼盼 , 孔新珂 , 赵仕凡 , 李峰
2020, 48(9): 1141-1148. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201249
[摘要](254) [FullText PDF](17)
摘要:
基于生物燃料电池的自供能生物传感器,目标物浓度直接与生物燃料电池的输出信号成比例关系,因此,自供能生物传感平台具有无需额外电源、装置简单、利于微型化、抗干扰能力强等突出优势。但是,生物燃料电池中常用的生物催化剂易失活,导致自供能生物传感器性能不佳。本研究采用分子印迹多孔金阳极为生物阳极,实现对葡萄糖的选择性催化,以Fe(CN)63-/聚咪唑鎓盐(Pim)/还原氧化石墨烯复合物Fe(CN)63-/Pim/rGO为生物阴极,构建生物燃料电池,集成阴离子交换策略与分子印迹技术,发展了一种基于生物燃料电池的自供能生物传感方法,实现了肝素(Hep)的超灵敏检测。当无目标分子Hep存在时,基于生物燃料电池的自供能生物传感器可获得较高的开路电压与输出功率;加入Hep后,由于聚合物Pim对Hep的亲和性远大于Fe(CN)63-,导致Fe(CN)63-从复合物Fe(CN)63-/Pim/rGO中释放,致使生物阴极得电子活性物质减少,阴极还原信号明显减弱,此时,开路电压和功率输出显著降低。基于此,可通过检测生物燃料电池输出性能的变化实现Hep的超灵敏检测,检出限低至0.01 pmol/L,低于目前文献中报道的检测方法。
L-精氨酸修饰柔性石墨烯平面电极对黄嘌呤的选择性检测
白志坤 , 张逸涛 , 李社红 , 罗红霞
2020, 48(9): 1149-1159. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201019
[摘要](179) [FullText PDF](25)
摘要:
在聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)的辅助下,将化学气相沉积(CVD)得到的石墨烯从铜基底转移到聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)基底上,制备了柔性石墨烯平面电极(GPE)。通过电化学沉积在GPE表面修饰L-精氨酸(L-Arg),得到聚L-Arg修饰的柔性石墨烯平面电极(P(L-Arg)/GPE)。用扫描电子显微镜(SEM)、能谱法(EDS)和拉曼光谱对此电极进行了表征。用循环伏安法(CV)和微分脉冲伏安法(DPV)研究了P(L-Arg)/GPE对黄嘌呤(XA)的电化学传感作用。在尿酸(UA)和次黄嘌呤(HX)存在下,P(L-Arg)/GPE传感器不仅实现了对XA的选择性测定,而且还成功实现了XA、UA和HX的同时测定,3个氧化峰的峰-峰电位差分别为420和384 mV。XA在0.5-8 μmol/L和8-140 μmol/L浓度范围内,响应电流与XA浓度分段呈良好的线性关系,检出限为0.08 μmol/L(S/N=3)。此传感器具有稳定性好、重复性强、响应时间短、制作成本低、抗干扰能力强等优点,并成功应用于人血清中XA测定。
基于气相色谱-质谱联用的抗结核药致肾损伤代谢组学及谷胱甘肽治疗作用研究
彭琳秀 , 谢彤 , 单进军
2020, 48(9): 1160-1168. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191579
[摘要](193) [FullText PDF](27)
摘要:
以异烟肼(INH,100 mg/(kg·d,ig))和RIF(RIF,100 mg/(kg·d,ig))为模型药物,连续灌胃14天诱导建立抗结核药大鼠肾损伤模型,以组织病理学、血清生化指标(尿素氮、肌酐)为考察对象,观察抗结核药物引起的肾损伤严重程度;采用基于气相色谱-质谱联用的代谢组学技术结合偏最小二乘法-判别分析等多维、单维统计方法探讨INH联用RIF对大鼠肾组织中内源性小分子化合物的代谢影响。采用对抗结核药物引起的组织细胞损伤具有保护作用的谷胱甘肽(GSH,250 mg/(kg·d,iv)对大鼠进行干预治疗,从代谢调控的角度阐明GSH发挥保肾的作用机制。组织病理学及血清生化结果显示,大鼠给予INH和RIF后,血清中尿素氮和肌酐水平显著升高(p<0.05),肾小管上皮中度空泡变性,提示肾组织出现损伤。代谢组学数据提示,结核药物联用导致了大鼠肾组织中酪氨酸、脯氨酸、尿苷、棕榈油酸等31个内源性物质代谢紊乱;主要导致了大鼠脂肪酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢异常。GSH能降低大鼠血清中尿素氮的水平(p<0.05),减轻大鼠肾小球系膜的增生情况;GSH能够通过调控肾组织中棕榈油酸、4-羟基丁酸、瓜氨酸、葡糖酸内酯、胍基乙酸和哌啶酸的代谢水平有效改善抗结核药物引起的大鼠肾组织损伤。
四电极系统下辅酶Q10在氧化锌纳米棒修饰电极上的光电检测
罗贵铃 , 牛燕燕 , 邵波 , 张晓萍 , 赵常志 , 孙伟
2020, 48(9): 1169-1176. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201181
[摘要](221) [FullText PDF](3)
摘要:
采用电沉积法制备了ZnO纳米棒修饰氧化铟锡(ITO)电极(ZnONR/ITO),利用四电极系统建立了一种高灵敏检测辅酶Q10(UQ10)的光电化学分析新方法。利用玻碳电极为第二工作电极,将溶液中UQ10预还原为UQ10H2,可作为电子供体在ZnONR/ITO上发生氧化反应,电子跃迁至导带后,光电流降低,进而用于检测UQ10。对电沉积ZnO纳米棒和光电化学检测条件进行了优化,在最优测定条件下,UQ10浓度的对数与光电流成反比,线性检测范围为1.0×10-12~1.0×10-5 mol/L,检出限为3.3×10-13 mol/L(S/N=3)。
钯-氧化锌纳米管修饰电极同时检测多巴胺、抗坏血酸和尿酸
唐倩 , 陈梦妮 , 朱国栋 , 刘建允
2020, 48(9): 1177-1184. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201241
[摘要](182) [FullText PDF](24)
摘要:
以PdCl2和Zn(Ac)2为起始物,采用静电纺丝方法结合高温煅烧,成功制备了钯-氧化锌(Pd-ZnO)中空纳米管。Pd的存在改善了ZnO晶体颗粒的均匀性,调控纤维向中空管状结构转变。利用扫描电子显微镜、透射电子显微镜、X射线衍射等表征技术证明了纳米管内径为240 nm,Pd纳米粒子粒径约为80 nm,且在纳米管上均匀分布。X射线光电子能谱证明,Pd纳米粒子主要以PdO形态存在。所得的Pd-ZnO修饰玻碳电极对多巴胺(DA)、抗坏血酸(AA)和尿酸(UA)均显示出良好的催化活性。采用差分脉冲伏安法测定含DA、AA和UA的混合液,三者的氧化峰电位在此修饰电极上可完全分离,对应的线性范围分别为3.0×10-7-3.0×10-5 mol/L(R2=0.9967)、1.0×10-5-1.0×10-3 mol/L(R2=0.9991)和6.0×10-6-6.0×10-4 mol/L(R2=0.9935),检出限(S/N=3)分别为1.0×10-8 mol/L、1.0×10-6 mol/L和3.0×10-6 mol/L。此电极重现性及稳定性良好,可同时测定样品中的DA、AA和UA。
基于生物金属有机骨架封装亚甲基蓝复合材料和信号放大策略高灵敏检测microRNA-141
王存 , 刘蕃鑫 , 惠俊敏 , 邹晓川 , 邓明川 , 郑天平 , 刘林
2020, 48(9): 1185-1192. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201222
[摘要](234) [FullText PDF](16)
摘要:
MicroRNA-141(miRNA-141)的检测对相关癌症的早期诊断和预后评估具有重要意义。本研究建立了一种无酶的生物传感器,用于高灵敏检测miRNA-141。首先,合成了具有多孔结构和良好生物相容性的生物金属有机骨架(bio-MOF),通过离子交换的方式,bio-MOF可以封装大量亚甲基蓝(MB)信号分子,并保持其生物活性。其次,利用目标物循环信号放大策略中的催化发夹自组装(CHA)、辅助目标miRNA-141循环,实现信号放大,进一步提高了传感器的灵敏度。在1.0×10-16-1.0×10-6 mol/L范围内,目标miRNA-141浓度的对数与传感器电化学信号呈线性相关,检出限为3.3×10-17 mol/L(S/N=3)。将此方法应用于健康人血清中miRNA-141检测,加标回收率为99.9%-102.0%(RSD≤2.1%)。此生物传感器简单、可靠、灵敏度高、线性范围宽,为高灵敏检测其它miRNA提供了参考。
杂交链式反应介导的发光银纳米簇系统用于miRNA-21的信号放大检测
张丽 , 潘敏 , 邹芷乔 , 樊蕾 , 刘晓庆
2020, 48(9): 1193-1201. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201144
[摘要](226) [FullText PDF](12)
摘要:
MicroRNAs(miRNAs)是多种疾病的生物标志物,同时也能为疾病治疗提供潜在靶点,因此,发展简单、快速、灵敏的miRNAs分析方法具有十分重要的意义。本研究结合杂交链式反应(HCR)高的信号放大能力和以DNA为模板合成的银纳米簇(DNA-AgNCs)优异的发光性能,构建了一种免标记的通用型荧光传感器,实现了miRNA-21的快速灵敏检测。将合成银纳米簇(AgNCs)的DNA模板封闭在HCR的反应物(发夹DNA)中,当存在靶标DNA时,发夹DNA的杂交链式组装反应被引发,释放出大量自由的AgNCs模板序列,进而引发近红外荧光DNA-AgNCs的合成,AgNCs的近红外荧光信号强度与引发链DNA的浓度成正相关。进一步通过在检测系统中引入一个封闭有HCR引发链序列的辅助发卡序列,建立通用型HCR-AgNCs传感分析系统,用于靶核酸分子检测。以miRNA-21为模型分析物,只在miRNA-21存在时,此辅助发卡才能被打开,并生成自由的HCR引发链,进而引发HCR反应和AgNCs的合成。本方法检测miRNA-21的线性范围为250 pmol/L~8 nmol/L,线性方程为(F-F0F0=-0.500+0.235 lg(C(pmol/L))(R2=0.9792),检出限(3σ/S)为19.9 pmol/L。这种基于HCR-AgNCs的检测方法具有免标记、简单、灵敏的优点,可作为通用的核酸传感平台,有望为疾病的临床诊断和治疗提供重要参考。
基于显色法的纸基微流控芯片用于水中的三氮检测
徐榕 , 杨叶欣 , 林敏 , 李晓东 , 冯爱玲
2020, 48(9): 1202-1209. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191634
[摘要](194) [FullText PDF](24)
摘要:
硝酸盐、亚硝酸盐和氨氮(简称"三氮")是水体中的主要污染物,目前我国的地表水和浅层地下水中普遍存在三氮污染问题。本研究将显色法与纸基微流控技术结合,制备了单通道纸基微流控芯片,在优化的反应条件下,分别对3种含氮化合物进行检测,亚硝酸盐、硝酸盐和氨氮的检出限分别为0.001 mmol/L、1 mmol/L和1 mg/L;在实际样本的检测中,3种样本的加标回收率均在95.4%~114.9%之内。其次,通过合理的结构设计将分别用于3种含氮化合物检测的单通道纸基微流控芯片集成于一体,制备出用于三氮同时检测的多通道纸基微流控芯片,多通道纸基微流控芯片的检测结果与单通道纸基微流控芯片的检测结果具有良好的一致性。本研究提出的基于显色法的多通道纸基微流控芯片可对水中的三氮进行同时检测,并且,此芯片具有成本低廉、灵敏度高和便于操作等特点,适用于现场快速检测,有望在资源匮乏的水源污染地区推广。
基于拉曼光谱技术的联苯苄唑药物有效成分的快速鉴定和生产溯源研究
罗思恒 , 周志明 , 黄剑英 , 潘城 , 李玲玲 , 郑淑凤 , 张志敏 , 刘国坤
2020, 48(9): 1210-1218. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191462
[摘要](263) [FullText PDF](13)
摘要:
有效成分的定性和定量分析是药物分析的核心。实际样品测定中,通常需要进行样品前处理,以消除复杂辅料成分的干扰,此过程耗时长,且难度较大。因此,发展快速定性筛查技术,提高药物分析的工作效率非常必要。本研究以联苯苄唑药品作为模型药物,将拉曼光谱技术和主成分分析(Principal components analysis,PCA)和支持向量机(Support vector machine,SVM)等机器学习算法联用,探讨了其用于药物有效成分快速定性分析的可行性。针对不同药品中辅料成分复杂、组成不一,并且其拉曼光谱谱图与低含量(1%)的联苯苄唑分子的谱图存在明显交叠的问题,以原料药的拉曼光谱为基准,利用PCA方法精准定位和提取成品药拉曼谱图中联苯苄唑分子的特征拉曼光谱信息,实现了准确定性分析。本研究无需获得每一种辅料的特征拉曼光谱谱图,根据拉曼谱图中1600和1650 cm-1等处谱峰的细微差异,采用PCA方法结合SVM分类器策略,实现了药物生产溯源的准确区分和鉴定。本研究为药物分析研究提供了一种无损快速溯源的分析方法。
原子力显微镜纳米压痕技术用于评估纳米药物功效
付彦丰 , 杨钰 , 张清荣 , 蔡明军 , 徐海娇 , 杨国程 , 单玉萍
2020, 48(9): 1219-1227. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201171
[摘要](226) [FullText PDF](5)
摘要:
具有靶向性药物递送和可控释放双重优势的纳米药物是抗肿瘤药物的研究热点。在纳米药物应用中,药效评估是非常重要的方面。本研究利用基于原子力显微镜(AFM)的纳米压痕技术,通过分析纳米药物作用后细胞力学性质(杨氏模量和粘弹性等)的改变,评估其药效。结果表明,与游离的阿霉素(DOX)相比,DOX及喜树碱(CPT)脂质体纳米药物对宫颈癌(HeLa)细胞的药效作用更明显。进一步检测DOX和CPT不同摩尔比(4:1和1:4)混合的脂质体纳米药物对HeLa细胞的药效差异,发现在DOX和CPT的摩尔比为4:1条件下,两种药物的协同作用增强了药效。对纳米药物作用后的HeLa细胞进行粘弹性评估,发现随着纳米药物作用时间的延长,细胞粘弹性随之降低。本研究提供了一种简单有效的筛选纳米药物的方法。
顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱联用法用于非目标性筛选饮用水中挥发性有机物
余明月 , 杨小秋 , 樊蓉 , 郑禹康 , 史建波 , 郑琦
2020, 48(9): 1228-1235. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191560
[摘要](265) [FullText PDF](25)
摘要:
建立了顶空-固相微萃取-气相气谱-质谱联用(HS-SPME-GC-MS)非目标性筛选饮用水中挥发性有机物(VOCs)的分析方法。以萃取物的数量和峰面积对HS-SPME的工作参数进行优化,考察了4种萃取纤维(100 μm PDMS、65 μm PDMS/DVB、85 μm PA和75 μm CAR/PDMS)的最佳工作条件,包括恒温时间、萃取时间、萃取温度及盐效应等。对4种纤维萃取出的物质种类和油水分配比系数进行了比较,发现100 μm PDMS的萃取物最少,且萃取物与其它纤维重复,可被另外3种萃取纤维代替。将优选出的3种萃取纤维对两种自来水水样(源水来自长江和汉江)进行非目标性筛选,对匹配度大于70%的物质进行了分析。结果表明,以汉江为源头的自来水水样中鉴定出35种物质,以长江为源头的自来水水样中鉴定出34种物质,两者共有物质18种。将两个水样中筛选的物质种类进行了比较,发现酯类物质最多,醛类物质和酚类物质次之。此方法不使用有机溶剂,对环境友好,可用于自来水中VOCs的筛选与分析。
直喷离子化质谱法快速鉴别粉防己和广防己
张朝辉 , 陈应庄 , 陈波 , 马铭
2020, 48(9): 1236-1243. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191725
[摘要](165) [FullText PDF](9)
摘要:
采用直喷离子化质谱法,通过对粉防己中的粉防己碱和防己诺林碱、广防己中的马兜铃酸A和木兰花碱的敞开式质谱行为进行研究,获得了粉防己(Stephania tetrandra)及其有毒伪品广防己(Aristolochia fangchi)的敞开式质谱轮廓,建立了直喷离子化质谱法简单快速鉴别粉防己和广防己的方法。结果表明,在正离子模式下,从敞开式质谱轮廓上,可以利用粉防己的标志性成分粉防己碱和防己诺林碱对粉防已和广防己进行快速鉴别。此方法具有简单、快速、无需样品前处理等优点,对防己药材的质量控制具有重要参考价值。研究了马兜铃酸A在敞开式质谱条件下的电喷雾电离行为,对敞开式质谱检测技术分析马兜铃酸A有借鉴意义。
近红外光谱和气相色谱-质谱联用分析烟用爆珠的研究
何媛 , 黄扬明 , 王瑶 , 赵悦婷 , 李小斌 , 张凤侠 , 徐磊 , 彭军仓 , 闵顺耕
2020, 48(9): 1244-1251. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201140
[摘要](253) [FullText PDF](14)
摘要:
分别采用近红外光谱(NIRS)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析了3种不同类型烟用爆珠。收集了清甜型、蜜甜型和薄荷型3种类型烟用爆珠的不同批次共27个样品,采集其NIRS谱图,通过光谱数据分析结合簇类独立软模式法(Soft independent modeling of class analogy,SIMCA)对3种烟用爆珠样品建立了分类模型,采用线性判别分析法(Linear discriminant analysis,LDA)对同一类型不同批次的烟用爆珠进行质量一致性评价,同时采用GC-MS法对3种类型烟用爆珠内含物中挥发性及半挥发性成分进行了分析。结果表明,烟用爆珠香型不同,其内含物挥发性及半挥发性成分差别较大;NIRS技术可以有效判别不同颜色壁材的爆珠;建立的SIMCA模型可区分3种类型烟用爆珠,且清甜型、蜜甜型和薄荷型烟用爆珠不同批次样品的区分准确度均在90%以上,建立的LDA模型可很好地区分3种类型不同批次的烟用爆珠。
串联质谱法实时直接测定茶叶中γ-氨基丁酸含量
屠钰 , 李无双 , 朗文成 , 马琳 , 武国华
2020, 48(9): 1252-1259. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191665
[摘要](158) [FullText PDF](26)
摘要:
对茶叶中γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,GABA)等多种功能性活性物质的快速检测,有利于茶叶资源的开发和有效利用。本研究建立了一种利用实时直接分析(DART)离子源与三重四极杆串联质谱联用快速高效定量分析茶叶中GABA含量的方法,测定了10种茶叶中GABA的含量。结果表明,不同茶叶中GABA的含量存在较大差异,其中九香翠芽中GABA含量最高,达到227.2 μg/g;其次是信阳毛尖,含量为161.2 μg/g;日照绿茶的GABA含量最低,为75.6 μg/g。本方法测得的结果与2,4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱(HPLC)检测法有较好的一致性。本方法简便、高效,为快速筛选具有高含量GABA的茶叶品种提供了一种简单有效的方法。
单颗粒-电感耦合等离子体质谱测定海水中银纳米颗粒
张春梅 , 徐强 , 杜静 , 田甲申 , 张华
2020, 48(9): 1260-1267. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201244
[摘要](186) [FullText PDF](15)
摘要:
建立了单颗粒-电感耦合等离子体质谱法(SP-ICP-MS)量化与表征海水中银纳米颗粒(AgNPs)的方法。筛选了SP-ICP-MS检测海水中AgNPs时的最优驻留时间,通过探究海水基质对AgNPs检测的影响,确定了海水样品稀释倍数,并利用本方法对大连市近岸海域3个站位表层海水样品中的AgNPs进行测定。结果表明,仪器最优驻留时间为100 μs,150倍稀释海水样品可提高AgNPs浓度的测定准确度。本方法测定海水中AgNPs数量浓度检出限为9.75×103 particles/mL,粒径检出限为12 nm,标称粒径50和100 nm AgNPs的平均加标回收率均大于70%。大连市近岸海域3个站位表层海水样品中均检测出AgNPs,数量浓度最大值为(2.1±0.004)×106 particles/mL,最小值为(1.1±0.01)×105 particles/mL,粒径分布在18~200 nm之间。本方法具有样品制备简单、分析速度快、颗粒物数量浓度检出限低等优点,为近岸海水中AgNPs的监测分析提供了可靠的分析方法。
抑制植物样品消解过程中硒挥发的方法
陈海杰 , 马娜 , 陈卫明 , 顾雪 , 张鹏鹏 , 张灵火 , 白金峰 , 于兆水
2020, 48(9): 1268-1272. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201174
[摘要](218) [FullText PDF](11)
摘要:
氢化物发生-原子荧光光谱法(HG-AFS)是测定植物样品中硒(Se)的理想方法,但植物样品中Se在消解过程中容易挥发损失,而使结果偏低。Se标准溶液采用HCl、HF、HClO4消解时,加热至蒸干后,Se会挥发损失,而单独采用HNO3消解时不会挥发损失,表明Se的挥发可能与F、Cl的存在有关。本研究发现,Ca2+可以有效抑制Se的挥发损失,基于此建立了HG-AFS测定植物样品中痕量Se的分析方法。取0.5000 g植物样品,加入8 mL 0.015 g/mL Ca2+,采用HNO3-HClO4(15:2,V/V)混合液于低温电热板进行消解,加热至蒸干,Se也不会挥发损失。考察了Ca2+对于共存干扰元素允许量的影响,发现加入Ca2+后,共存干扰元素的允许量并未发生明显变化。本方法检出限为4.95 ng/g,精密度达到2.56%-3.17%,采用不同类型的植物标准物质验证,测定值与标准值吻合。
红外光谱法研究胃蛋白酶在表面上的构象变化
郭小咪 , 张晓轩 , 褚伍波 , 江南 , 李赫
2020, 48(9): 1273-1278. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201189
[摘要](161) [FullText PDF](11)
摘要:
胃蛋白酶是哺乳动物的一种极其重要的消化酶,通过水解特定氨基酸间的肽键从而分解食物中的蛋白质。胃蛋白酶是一种酸性蛋白酶,对周围环境的酸碱度比较敏感。本研究采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术研究了不同pH值和表面性质对胃蛋白酶二级结构的影响。结果表明,随着pH值的增大,β-折叠结构的比例先增加,在pH 3~7之间达到最大值,然后在溶液为碱性时降低,无规卷曲结构比例则与之相反。衰减全反射(ATR)晶体表面存在TiO2时,β-折叠结构含量远高于其它二级结构,且随着pH值变化,各二级结构比例没有明显的变化。通过对比吸收峰强度发现,胃蛋白酶与TiO2表面的相互作用有利于溶液中胃蛋白酶的吸附,表明基底表面的官能团对胃蛋白酶的构象也有影响。