首页 杂志概况 投稿须知 在线投稿 在线阅读 征订启事 广告服务 行业资讯 企业动态 资料中心  专访报道 会展信息 ENGLISH

在线审稿投稿系统

在线阅读

2020年48卷7期

目录
分析化学 2020年第48卷第7期 封面及目次
2020, 48(7): 0-0.
[摘要](92) [FullText PDF](23)
摘要:
特约来稿
主客体作用在生化分析中的应用研究进展
崔琳 , 赵敏惠 , 张春阳
2020, 48(7): 817-826. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201090
[摘要](54) [FullText PDF](18)
摘要:
主客体作用是主体和客体在满足结构互补和能量匹配的条件下,通过非共价相互作用选择性结合,形成具有特定功能的超分子的过程。生物体系中的抗原-抗体、DNA-蛋白质、酶-底物等生物分子之间的识别都建立在非共价作用识别的基础上。主客体识别反应具有反应条件温和、反应过程动态可逆等特点,不仅可有效克服共价结合的局限性,而且能在分子水平上模拟生物功能。本文综述了主客体作用在生化分析中的应用的最新研究进展,并对基于主客体作用的传感器的发展趋势做了展望。
评述与进展
组织样品大气压质谱分析研究
王雨芬 , 卢海艳 , 张华 , 陈焕文
2020, 48(7): 827-837. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191704
[摘要](45) [FullText PDF](13)
摘要:
组织样品中含有丰富的生物分子信息,是代谢组学、脂质组学、蛋白质组学等研究的物质基础。近年来,大气压质谱分析(AMS)技术因具有无需样品预处理即可直接获取组织样品中生物分子种类及含量信息的能力,在组织样品分析中突显了高通量、高灵敏度、高准确性、低样品耗量的特点,已逐渐成为分析组织样品不可或缺的手段。本文以常见的植物、动物和临床术后组织样品为代表,介绍了近年来AMS技术在组织样品分析中的应用进展,结合成像技术,讨论了组织样品AMS的发展趋势。
仪器装置与实验技术
高灵敏、宽动态范围纳米流式检测装置的研制及应用
毛翠萍 , 林垚 , 牛倩 , 薛乘风 , 颜晓梅
2020, 48(7): 838-846. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201227
[摘要](36) [FullText PDF](6)
摘要:
基于纳米颗粒固有的多分散性,对其粒径及分布快速地进行高分辨表征是纳米颗粒相关研究和产品开发所面临的重大挑战。与电子显微镜、原子力显微镜、动态光散射、纳米颗粒追踪分析等常规使用的纳米颗粒表征技术相比,流式细胞术具有可单颗粒检测、快速、多参数、统计精确性高等优势。然而,由于检测灵敏度的局限性,商品化流式细胞仪难以检测粒径小于200 nm的聚苯乙烯纳米颗粒。结合瑞利散射和鞘流单分子荧光检测技术,本研究组研制了纳米流式检测装置(Nano-flow cytometer,nFCM),采用单光子计数雪崩光电二极管(Single photon counting avalanche photodiode,APD)作为检测器,低折射率二氧化硅纳米颗粒(SiO2 NPs)的检测下限可达到24 nm,可基线分辨47、59、74、94和123 nm的SiO2 NPs混合样本。由于nFCM散射光检测动态范围受限于单光子探测器的最大光子计数值,而纳米颗粒的散射光强度随粒径的增大呈指数上升,为实现纳米颗粒更全面的粒径分布检测,仪器的检测动态范围有待提升。本研究采用激光光束整形、双光阑降低背景信号、高量子效率光电倍增管检测器等策略对仪器进行多方位改进,以研制高灵敏、宽动态范围的nFCM。改进后的nFCM可实现直径59 nm SiO2 NPs的高信噪比检测(S/N=119),可基线分辨59、74、94、123、160、180和222 nm的SiO2 NPs混合样本,相比以APD为检测器的nFCM,粒径检测范围扩展约100 nm,并成功用于鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡(Outer membrane vesicles,OMVs)粒径分布的快速测定。
研究报告
细胞迁移介导的金纳米颗粒外排作用成像研究
谢晓冬 , 殷敏 , 李茜 , 陈楠
2020, 48(7): 847-854. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201109
[摘要](22) [FullText PDF](8)
摘要:
阐明纳米材料的细胞外排途径对于其在临床医疗方面的应用转化至关重要。然而,对于纳米材料是否会在细胞迁移的过程中被清除,还缺乏直接的证据和结论。本研究以金纳米颗粒(AuNPs)作为成像探针,利用暗场显微镜实时地观察和分析了细胞迁移过程中,AuNPs在收缩丝内的运动和外排过程。结果表明,部分被细胞摄取的AuNPs存在于收缩丝内,且颗粒的运动速率随着其与胞体距离的增大而减小,当收缩丝与胞体断开联系后,AuNPs被遗留在胞外。研究结果表明,外源性的纳米材料可以在细胞迁移过程中被外排。此研究结果有助于设计更安全高效的纳米材料,并应用于诊断和治疗。
微流控芯片液滴数字化分析用于快速定量检测细菌
何浩延 , 黄恩奇 , 黎柱均 , 舒博文 , 徐邦牢 , 刘大渔
2020, 48(7): 855-862. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201022
[摘要](43) [FullText PDF](9)
摘要:
现有细菌定量检测多依赖专业实验室,检测周期较长。针对此问题,本研究基于微流控芯片液滴数字化分析,建立了一种细菌定量检测方法。采用具有平行液滴分析单元的微流控芯片,其特点在于使用了注射器真空驱动液滴产生方法。借助刃天青显色反应引起的荧光强度改变,可指示液滴内活性细菌的存在。通过计算细菌阳性液滴的比例,采用泊松分布算法,计算出原始样品中的细菌密度。实验结果表明,本方法可在3.5 h内完成细菌定量分析,动态检测范围为105~108 CFU/mL,相对标准偏差(RSD)低于5%。本方法具有操作简便和分析速度快的优势,有望广泛用于细菌快速定量检测。
基于不同链长DNA-金纳米粒子的阵列比色传感器对多种重金属离子的鉴别
边孟孟 , 徐梦 , 袁亚利 , 聂瑾芳
2020, 48(7): 863-870. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191325
[摘要](24) [FullText PDF](8)
摘要:
构建了一种基于DNA-金纳米粒子(DNA-AuNPs)的无标记比色阵列传感器,用于多种金属离子的鉴别。以不同长度单链DNA(ssDNA)链(15A、30A和45AT)作为非特异性受体,分别与AuNPs结合,构成3个复合体系(15A DNA-AuNPs、30A DNA-AuNPs、45AT DNA-AuNPs),作为此传感器的3个阵列传感元件。在高浓度盐的存在下,不同的金属离子可触发DNA保护的AuNPs显示出不同的聚集行为并呈现各种颜色变化。以紫外-可见吸收光谱作为传感器的响应信号,通过主成分分析(PCA)和线性判别分析(LDA)对此比色传感器的响应信号进行分析。实验结果表明,11种不同重金属离子(Ag+、Pb2+、Zn2+、Cu2+、Cd2+、Mn2+、Ni2+、Co2+、Hg2+、Bi3+、Cr3+)在0.5 μmol/L水平下,通过LDA可得到很好的区分。
自催化型石墨烯-金纳米探针的制备及用于非小细胞肺癌CYFRA21-1电化学检测
李瑞怡 , 储红霞 , 余敏仪 , 李姝晗 , 李在均
2020, 48(7): 871-880. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191453
[摘要](38) [FullText PDF](3)
摘要:
早期诊断对提高肺癌患者生活质量和延长生存期至关重要。本研究通过热解柠檬酸与谷氨酰胺的混合物得到谷氨酰胺功能化石墨烯量子点(Gln-GQD),所制备的Gln-GQD与HAuCI4反应形成Gln-GQD/Au复合物。Gln-GQD作为还原剂将Au3+转化为Au0,最终形成Au纳米晶体。Gln-GQD还作为稳定剂被固定于Au纳米晶体的表面,从而实现Gln-GQD与Au的杂交。扫描电镜、透射电镜、X-射线衍射和红外光谱分析表明,Gln-GQD/Au平均粒径为(31.2±0.15) nm,具有立方金的晶体结构,Au和N元素均匀分布于球形粒子表面,含有丰富的OH、-NH、-COOH等功能基团。将发夹DNA 2(H2)通过Au-S键连接到Au纳米粒子表面,再利用EDC/NHS活化实现Gln-GQD的-COOH与硫堇(Thi)的氨基缩合,得到H2-Gln-GQD/Au-Thi氧化还原探针,基于此构建了无酶放大电化学传感平台。在CYFRA21-1存在下,此传感平台的H2可与预先修饰在金电极表面的发夹DNA 1(H1)杂交,释放出一个CYFRA21-1分子,所释放的CYFRA21-1可直接用于下一次靶DNA循环。通过靶诱导的DNA自组装链式反应,一个CYFRA21-1靶分子可将多个氧化还原探针固定在金电极表面,从而产生显著的电化学信号放大效应。H2与H1的杂交实现对靶DNA的特异性响应,Thi在电极表面发生可逆性氧化还原反应,对靶DNA的响应产生电化学信号,而Gln-GQD/Au原位催化Thi的氧化还原反应将进一步放大检测信号。CYFRA21-1浓度在2~100000 fmol/L之间,其差分脉冲伏安峰电流随CYFRA21-1浓度增加而线性增大。本方法检出限为0.67 fmol/L(S/N=3),灵敏度明显优于文献报道的方法。本方法成功用于人血清中CYFRA21-1的电化学检测。
基质辅助激光解析质谱成像可视化分析三七皂苷空间分布
刘芳 , 赵瀚森 , 孙公伟 , 宋哲 , 徐富建 , 马明英 , 张四纯
2020, 48(7): 881-888. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201066
[摘要](40) [FullText PDF](8)
摘要:
根据2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)、石墨烯(GR)、氧化石墨烯(GO)和碳纳米管(CNT)5种基质混合人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1以及三七皂苷R1 3种标准品得到的质谱信号,选取DHB为基质。将20 μm厚度的三七根茎冷冻切片真空干燥40 min后,在循环60次、喷雾强度30%、喷雾时间1 s、孵育时间40 s、干燥时间60 s的条件下,将DHB均匀覆盖于切面。质谱数据采集质量范围为m/z 0-1500 Da,使用PEG-600进行质荷比校准,以1000 Hz频率的正离子反射模式进行基质辅助激光解吸质谱成像(MALDI-MSI),观察到10种皂苷在三七根茎木栓层、韧皮部、木质部以及髓部的3种空间分布情况,同时对质谱数据进行t-分布领域嵌入算法分析(t-SNE),实现了2年生和3年生三七根茎的区分。本研究为三七根茎组织中代谢物的表征提供了原位、可视化的方法,也为三七根茎的特异性提取提供了有价值的信息。
基于对半胱胺保护的金纳米粒子催化活性的抑制检测氰根离子
赵丹 , 李娜 , 许艳杰 , 黄晶晶 , 陈传霞
2020, 48(7): 889-895. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.201051
[摘要](30) [FullText PDF](1)
摘要:
利用氰根离子(CN-)对带正电荷的半胱胺保护的金纳米粒子(cyst-AuNPs)过氧化物模拟酶催化活性的抑制,建立了一种简单、灵敏测定CN-的比色传感方法。Cyst-AuNPs可催化过氧化氢(H2O2)氧化四甲基联苯胺(TMB),生成蓝色的oxTMB,最大吸收波长为652 nm。由于CN-对cyst-AuNPs的蚀刻作用,cyst-AuNPs的催化活性减弱,导致生成的oxTMB量变少,溶液颜色变浅,652 nm处的吸光度下降,而颜色变浅和吸光度下降的程度与CN-的浓度直接相关。基于催化体系的放大效应,此比色方法的灵敏度高,在最佳条件下,检测CN-的线性范围为2~10 μmol/L和10~140 μmol/L,检出限为0.33 μmol/L(S/N=3)。本方法不需要对金纳米粒子表面进行修饰,具有操作简单、成本低、结果可视化等优点,具有潜在的实际应用价值。
土壤埋藏对常见彩绘文物蛋白胶料形貌和结构的影响
马珍珍 , 王丽琴 , 张亚旭 , 由蕊 , 郭芷彤 , 杨璐
2020, 48(7): 896-902. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191620
[摘要](38) [FullText PDF](4)
摘要:
利用扫描电子显微镜(SEM)、X-射线衍射法(XRD)和红外光谱法(FTIR)对猪皮胶、全蛋、蛋清、蛋黄、牛奶5种常见彩绘文物蛋白胶料老化前后的形貌、结晶度、红外光谱吸收特征和蛋白质二级结构含量进行了对比研究。结果表明,5种胶料老化后,表面规则的结构和纹理遭到破坏,整体变得松散;结晶度降低,尤以牛奶最显著;老化后,5种蛋白胶酰胺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ带红外吸收的阶梯状特征仍然明显,但螺旋结构已经解离,且均呈现α-螺旋含量降低、β-折叠和无规则卷曲含量增高的趋势,说明分子结构从有序趋于无序状态。
超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨质谱用于太平洋鳕鱼脂质轮廓分析
蓝皓慧 , 王昕岑 , 张晓梅 , 张鸿伟 , 丛培旭 , 徐杰 , 薛长湖
2020, 48(7): 903-911. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191595
[摘要](42) [FullText PDF](14)
摘要:
建立了超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨质谱(UPLC-Triple TOF-MS/MS)分析脂质轮廓的方法。色谱柱选用ACQUITY UPLC CSH C18柱(150 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相A为乙腈-水(65:35,V/V),流动相B为异丙醇-乙腈(85:15,V/V),两者均含5 mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸;质谱采用IDA自动二级扫描模式。13类脂质标准品在一定浓度范围内具有良好的线性关系,线性相关系数(R2)均大于0.995,检出限(LOD)为0.001~0.25 μmol/L,定量限(LOQ)为0.0025~0.2 μmol/L,相对标准偏差(RSD)均小于10%,大部分标准品的回收率大于80%。采用氯仿-甲醇(2:1,V/V)提取太平洋鳕鱼肌肉组织中的脂质,共鉴定出498个脂质分子种类,包括255个磷脂、52个鞘脂、191个甘油酯,主要亚类分别为磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、甘油二酯。本方法具有高灵敏、高分辨和高通量等优点,可用于太平洋鳕鱼脂质轮廓的分析,为脂质组学在水产品领域中的应用奠定了方法学基础。
银基负载的氧化石墨烯磁性纳米复合材料的合成、表征及其对2,4-二氯酚的吸附
陈素清 , 沈茂 , 梁华定 , 鲍明辉
2020, 48(7): 912-920. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191723
[摘要](22) [FullText PDF](2)
摘要:
以溶剂热法制备得到磁性Ag/AgCl@Fe3O4@GO纳米复合材料,利用透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、X射线能谱(EDX)和N2吸附-脱附对样品的结构和形貌进行测试表征,研究了材料对水溶液中2,4-二氯酚(2,4-DCP)的吸附性能。此纳米复合材料由具有介孔结构的球形磁性纳米颗粒Ag/AgCl@Fe3O4负载在一层带褶皱的氧化石墨烯表面制备而成,平均孔径Sp为13.98 nm,比表面积为46.91 m2/g,孔体积为0.1791 cm3/g。Ag/AgCl@Fe3O4@GO复合材料对2,4-DCP的吸附实验表明,对于20 mg/L 2,4-DCP溶液,20 min基本达到吸附平衡,吸附量为13.74 mg/g;吸附以拟二级动力学模型为主导,相关系数为0.9995;吸附符合Langmuir模型,相关系数为0.9841~0.9972,为单分子层吸附;吸附热力学参数ΔG分别为-5.0462 kJ/mol(293 K)、-4.4076 kJ/mol(303 K)、-3.7522 kJ/mol(313 K)、-3.4358 kJ/mol(323 K),ΔH为-17.1653 kJ/mol,ΔS为-42.2158 J/(mol·K)。吸附过程为放热熵减小的自发过程,温度越低,越利于吸附,具有物理吸附特征。此复合材料具有较好的吸附活性,还可通过外加磁场的方式实现回收再利用。
金黄色葡萄球菌候选特征肽的靶向分析
赵宏 , 王玉迎 , 赵良娟 , 宓捷波 , 赵化冰 , 张峰 , 冯峰 , 曾静 , 王洪彬 , 董志珍
2020, 48(7): 921-927. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191703
[摘要](35) [FullText PDF](1)
摘要:
采用液相色谱-串联质谱联用的靶向分析技术,通过检测食源性致病菌金黄色葡萄球菌水解生成的特征肽,实现食品中致病菌的高效检测。针对文献报道的金黄色葡萄球菌的9种候选特征肽,验证了这些特征肽的靶向分析方法,考察和比较了分析效能。结果表明,基于多反应监测模式的靶向分析方法灵敏度高,更适于特征肽的检测;确定了每个特征肽最佳的碎片离子质量,进一步的生物样品分析结果表明,I1(AYLAVPAAPK)、I2(DYNSPTLIGWVK)、I5(AGYTVNNTPK)和I6(SISSGYTSGR)更适合作为金黄色葡萄球菌的候选特征肽。本研究为大规模验证候选特征肽的鉴定效果奠定了基础,为特征肽检测策略在食源性致病菌检测中的应用提供了参考。
QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法同时测定芝麻油中7种农药残留
徐芷怡 , 陈梦婷 , 侯锡爱 , 刘丹
2020, 48(7): 928-936. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191644
[摘要](31) [FullText PDF](8)
摘要:
采用分散固相萃取QuEChERS前处理方法,结合高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS),建立了精甲霜灵、丁草胺、乙草胺、异丙甲草胺、氟环唑、嘧菌酯、高效氟吡甲禾灵7种常用于油料作物的农药在芝麻油中的多残留分析方法。针对芝麻油基质的复杂性,对目标农药在芝麻油基质中的提取溶剂、净化剂种类进行筛选及优化,最终确定用10 mL乙腈涡旋提取一次,组合60 mg N-丙基乙二胺(PSA)和20 mg石墨化碳黑(GCB)去除芝麻油中脂肪、色素等干扰物,并利用HPLC-MS/MS进行定量分析。芝麻油中7种目标农药在0.001~10 mg/L浓度范围内呈良好线性关系,线性相关系数R2>0.99;7种目标农药在芝麻油中3个添加水平的平均回收率在86.9%~106.3%之间,RSD<5.2%,准确度、精密度和灵敏度均满足农药残留检测的要求。本研究建立的快速、简便、环保的方法适用于芝麻油中目标残留农药定量分析。
分散固相萃取-增强型去除脂质技术结合超高效液相色谱-串联质谱法测定塑料包装焙烤食品中12种抗氧化剂和紫外吸收剂
黄宇锋 , 温少楷 , 王莉 , 冼燕萍 , 郑慷 , 王斌 , 梁明 , 吴玉銮 , 胡均鹏 , 陈荣桥
2020, 48(7): 937-945. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191506
[摘要](45) [FullText PDF](3)
摘要:
建立了QuEChERS EMR-Lipid技术结合超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)同时检测塑料包装焙烤食品中4种抗氧化剂和8种紫外吸收剂的方法。样品经乙腈-丙酮(1:1,V/V)提取,QuEChERS EMR-Lipid技术净化,BEH C18色谱柱分离,甲醇-10 mmol/L乙酸铵梯度洗脱,串联质谱电喷雾正、负离子扫描,多反应监测(MRM)模式检测,采用外标法进行定量分析。结果表明,12种目标物在一定的浓度范围内线性关系良好(R2>0.9978),方法检出限(S/N=3)在5.0~10.0 μg/kg之间(除Antioxidant 2246的检出限为150.0 μg/kg外),回收率为80.3%~118.5%,日内精密度RSD(n=6)为1.7%~9.8%,日间精密度RSD(n=5)为4.5%~9.9%。本方法前处理简单快速、净化效果好、灵敏度高,适用于塑料包装焙烤食品中抗氧化剂和紫外吸收剂的检测。
基于单颗粒电感耦合等离子体质谱技术的金纳米颗粒准确测定和表征
巢静波 , 王静如 , 张靖其
2020, 48(7): 946-954. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191740
[摘要](33) [FullText PDF](7)
摘要:
建立了基于单颗粒电感耦合等离子体质谱(SP-ICP-MS)技术的金纳米颗粒(AuNPs)数量浓度和粒径的准确测定方法,考察了传输效率计算方式、驻留时间、稀释试剂、进样方式等对测定结果的影响。传输效率对结果准确度影响较大,应根据测量目标参数选择传输效率计算方式,并在测定过程中保持传输效率的稳定,利用校准标准对其进行校正。驻留时间的选择直接影响结果的精确程度,应根据样品类型、粒径等性质慎重选择数据处理模式。当驻留时间为0.1 ms时,检测30 nm和60 nm AuNPs的线性范围分别为2~40 pg/g和10~200 pg/g,线性相关系数大于0.9998,数量浓度测定结果的相对标准偏差小于3.80%,颗粒数量浓度和粒径的检出限分别为110 NPs/g和9 nm。对合成的4种AuNPs和国际比对样品分别进行了测定,国际比对样品颗粒数量浓度结果与比对参考值偏差<5%,测定结果等效一致,扩展不确定度<15%(k=2),进一步验证了本方法的准确度和适用性。
超高效液相色谱-串联高分辨质谱对刺梨槲皮素及其糖苷类化合物的鉴定分析
王翼 , 顾苑婷 , 丁筑红 , 陈思奇 , 肖仕芸 , 余奕宏 , 杜勃峰 , 宋煜婷
2020, 48(7): 955-961. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191338
[摘要](38) [FullText PDF](6)
摘要:
为探明刺梨中的槲皮素组分及其结合态糖苷类化合物构成,采用超高效液相色谱-串联高分辨质谱法,通过标准品保留时间对照、相对分子质量、二级质谱碎片等信息对刺梨槲皮素及其糖苷类化合物进行了解析。从刺梨中共鉴定出1种槲皮素与9种含有槲皮素母核结构物质,可确定化学组成的化合物为槲皮素、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-[6 "-O-(3-羟基-3-甲基戊二酰)-β-D-半乳糖苷]、槲皮素-3-O-葡萄糖-鼠李糖苷,其中,槲皮素-3-O-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-[6"-O-(3-羟基-3-甲基戊二酰)-β-D-半乳糖苷]首次在刺梨中发现。根据离子碎片推断槲皮素糖苷裂解途径,丰富了刺梨资源的基础研究成果,为槲皮素结构鉴定以及后续开发刺梨槲皮素糖苷的药食利用价值提供了参考。
新型便携式RGB色度传感器定量检测水中路易氏剂
于竞翔 , 刘国宏 , 任丽君 , 刘萌 , 黄志平 , 李建 , 李丹萍 , 肖艳华
2020, 48(7): 962-968. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191431
[摘要](42) [FullText PDF](26)
摘要:
基于路易氏剂及其水解产物在碱性条件下与亚铜离子反应,溶液呈红色的原理,构建了定量检测水中路易氏剂的新型便携式RGB色度传感器。对增溶剂、还原剂的种类、还原剂浓度、CuCl2浓度、NaOH浓度、乙酸用量、反应温度、反应时间等因素进行优化,得到最优反应条件:增溶剂为明胶,还原剂为盐酸羟胺,盐酸羟胺浓度为0.32 mol/L,CuCl2浓度为0.15 mol/L,NaOH浓度为30%(m/m),36%(m/m)乙酸用量为30 μL,反应温度为室温,反应时间为5 min。在检测中采用源于归一化RGB系统的RGB(红绿蓝)色度法,克服了基于RGB模型的由于光强变化会导致3个刺激值的变化的问题。在最优条件下,色度值与路易氏剂浓度的标准曲线的线性范围为0.40~10.05 mg/L。本方法对R值和B值的理论检出限为0.389 mg/L和0.391 mg/L,实际检出限为0.40 mg/L。将本方法应用于人工水样中路易氏剂的测定,回收率为96.9%~106.9%。本方法具有较高的选择性、灵敏度和较好的重复性。