会员登陆: 用户名:  密码: 验证码:
首页 杂志概况 投稿须知 在线投稿 在线阅读 征订启事 广告服务 行业资讯 企业动态 资料中心  专访报道 会展信息 ENGLISH

药典方法——凝胶净化-固相萃取-气质法测定人参中 的22种有机氯

来源:莱伯泰科 阅读数:83 时间:2017-11-24 14:42:04

前言:有机氯类农药是使用最早、应用最广的杀虫剂之一,50-60年代在全世界广泛生产和应用,曾在防治害虫上起过积极作用。但其对环境的污染较为严重,大量使用会直接造成对农作物的污染,同时农药残留在水和土中,通过食物链进入人体,而人体又不易通过新陈代谢把它排出体外,当积累到一定程度,就会使人中毒,造成肝肾脏器损害。2015版药典增加了22种有机氯类农药残留量测定的新方法,以此来监控中药中有机氯类农药的残留情况。

本实验参考2015版药典第四部通则2341第二法中第2项方法,以常见白参为样品,简要介绍了人参提取液净化、浓缩到检测的一整套方法。使用了莱伯泰科AutoClean全自动凝胶净化系统、Sepline-S2全自动固相萃取系统和MultiVap-8八通道平行浓缩仪。实验方法简便、回收率较高且平行性良好,适用于人参中22种有机氯类农药的检测。

关键词:有机氯、MV5、SPE 1000

试验过程

1实验部分

1.1 仪器与试剂

AutoClean全自动凝胶净化系统(莱伯泰科公司);

Sepline-S2全自动固相萃取系统(莱伯泰科公司);

MultiVap-8八通道平行浓缩仪(莱伯泰科公司);

QHS-66多样品快速均质系统(莱伯泰科公司);

7890B气相色谱-5977B质谱联用仪(安捷伦公司);

22种有机氯标准品(10μg / mL,溶剂为异辛烷,中国食品药品检定研究院);

乙酸乙酯(色谱纯);环己烷(色谱纯);丙酮(色谱纯);正己烷(色谱纯);异辛烷(色谱纯);

凝胶渗透色谱柱(400mm×25mm,BIO-Beads S-X3填料);

弗罗里硅土固相萃取柱(1000mg/6mL,LabTech)


1.2 标准工作液配置

移取1000μL的有机氯标准品溶液至10mL的容量瓶中,用异辛烷定容至刻度,摇匀。配成浓度1μg/mL的溶液,作为标准储备液。

精密吸取500μL的上述标准储备液至10mL的容量瓶中,用异辛烷定容至刻度,摇匀。配成浓度50ng/mL的溶液,作为标准工作液。


1.3 样品处理

1.3.1 提取

将白参样品粉碎成粉末(过三号筛),混匀,取约1.5g,精密称定,置于50mL聚苯乙烯具塞离心管中,加入水10mL,混匀,放置2小时。

加入乙腈15.0 mL,均质1分钟,再加入预先称好的无水硫酸镁4g与氯化钠1g的混合粉末,再次均质1分钟后,离心(4000转/分钟)1分钟。

吸取上清液10.0 mL,40℃浓缩至近干,用乙酸乙酯-环己烷(1:1)混合溶液分次转移至10mL量瓶中,加乙酸乙酯-环己烷(1:1)混合溶液至刻度,摇匀,转移至预先加入1g无水硫酸钠的离心管中,振摇,放置1小时,离心(必要时过滤),取上清液至AutoClean全自动凝胶净化系统的进样瓶中(上清液要大于6mL)。


1.3.2 凝胶净化

将1.3.1中装有提取液的进样瓶放置在AutoClean全自动凝胶净化平台,并按照图1在软件中编辑方法,开始凝胶净化,净化后收集液收集在50mL近干浓缩杯中。


1.3.3 浓缩

直接将50mL近干浓缩杯移至MultiVap-8八通道平行浓缩仪中,40℃氮吹浓缩,中间用少量正己烷淋洗几次,浓缩至近干,加入1.0 mL正己烷使溶解,待净化。


1.3.4 固相萃取净化

按照图2方法进行净化实验,其中丙酮、正己烷溶液配比为5:95(体积比)。收集液再次用MultiVap-8浓缩至近干,用异辛烷定容至1.0 mL,待测。

1.4 样品加标处理

按1.3方法处理样品过程中,在用乙酸乙酯-环己烷(1:1)定容前,往10mL容量瓶中加100μL的1.2方法所配的标准储备液,然后按照1.3.2~1.3.4方法进行实验,实验进行六组,最后用异辛烷定容至1.0 mL,用来测定加标回收率。


1.5 GC/MS检测条件

分析柱:DB-17(30m*0.25mm*0.25μm);验证柱:DB-1 (30m*0.25mm*0.25μm);进样口温度:240℃;不分流进样;初始柱流速:1.3mL/min;恒压模式;进样量:1.0μL;柱温:70℃保持1min,以10℃/min升至180℃,保持5min,再以5℃/min升至220℃,最后以100℃/min升至280℃,保持8min。

电子轰击源(EI);四极杆温度:150℃;离子源温度:230℃;辅助加热温度:290℃;扫描模式:SIM;溶剂延迟时间:10min。

试验结果

2.1 有机氯标准工作液选择离子流谱图

图3有机氯标准工作液选择离子流谱图

2.2 加标样品的选择离子流谱图

图4加标样品的选择离子流谱图

2.3 加标样品的回收率

表1 DB-17柱检测加标样品回收率


表2 DB-1验证柱加标样品回收率

结论

由表1和表2可知,凝胶净化-固相萃取-气质法测定中药中的22种有机氯,加标回收率为72.6%~115.4%, RSD为1.9%~6.8%。本方法测定的样品加标浓度为0.03mg/kg。

用该方法进行实际人参样品检测,其中β-六六六的含量为0.01 mg/kg,六氯苯的含量为0.02mg/kg,其余20种有机氯未检出。

50mL浓缩杯同时适用于这三种仪器,实验过程减少了人为的液体转移,能够有效的减少转移过程中造成的损失。

综上所述,凝胶净化-固相萃取-气质法测定中药中的22种有机氯这一实验中,莱伯泰科AutoClean全自动凝胶净化系统、Sepline-S2全自动固相萃取系统和MultiVap-8八通道平行浓缩仪能够高效、稳定地达到实验的要求,可以提供领域范围内的良好应用。

参考标准:

1、2015版药典 第四部 通则2341农药残留测定法