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枣中糖类的测定

来源: 日立高新技术公司 阅读数:79 时间:2020-09-17 16:53:33

枣中糖类测定 



磷酸-苯肼柱后衍生法



入秋了, 又到了吃枣的季节。枣果不仅是滋补佳品, 也是一味传统的中药, 并且枣中含有多种糖类。糖类是自然界中广泛分布的一类重要的有机化合物, 是一切生命体维持生命活动所需能量的主要来源。




在高效液相色谱仪(HPLC)测试中, 糖类的分子通常采用通用型检测器检测, 如示差折光检测器(RI)进行检测。


但采用RI检测器有两个明显的缺点: 灵敏度低、不能梯度洗脱。采用磷酸-苯肼柱后衍生法测定糖类, 可以克服RI检测器的以上两个缺点。


下面我们使用日立Chromaster高效液相色谱仪, 利用磷酸-苯肼柱后衍生法进行糖类的分析。色谱柱将糖类分离, 再与磷酸-苯肼溶液在高温下反应, 使用有选择性, 高灵敏度的荧光检测器进行检测, 梯度洗脱可以多种糖成分同时分析。


此方法克服了示差折光检测器的灵敏度低和不能梯度洗脱的缺点。






日立实验









流路图



仪器配置: Chromaster 5110 泵, 5210 自动进样器, 5310 柱温箱, 5410 UV检测器, 5510反应单元


◎ 标准品测定例



◎ 系统适用性 (100 mg/L 糖标准混合液)


聚合物基质色谱柱


硅胶基质色谱柱


分别对硅胶基质和聚合物基质色谱柱的系统适用性进行评价, 理论塔板数按蔗糖峰计算, 分离度以葡萄糖和半乳糖的分离度计算, 结果得到色谱柱的理论塔板数和分离度如上表所示。


聚合物基质色谱柱的测定,理论塔板数较低,但色谱柱的寿命较长;硅胶基质色谱柱的测定,色谱峰的峰形尖锐,分离度改善很多。后续实验均采用硅胶基质色谱柱。



◎ 线性



以半乳糖和蔗糖为例, 各种糖成分在10 ~ 500 mg/L标准混合液的浓度范围内, R2 ≥ 0.9995, 线性关系良好。



◎ 重现性



◎ 枣样品的分析结果



对大枣样品进行了糖成分的分析, 结果在枣中检测到果糖、葡萄糖和蔗糖成分, 并且均得到很好的分离效果。