会员登陆: 用户名:  密码: 验证码:
首页 杂志概况 投稿须知 在线投稿 在线阅读 征订启事 广告服务 行业资讯 企业动态 资料中心  专访报道 会展信息 ENGLISH

你对咖啡因有多上瘾?强势围观!

来源:莱伯泰科 阅读数:160 时间:2017-12-11 11:32:40

前言

我们都知道腺苷被认为是调节睡眠的内稳态因子之一。当我们感觉非常累,觉得自己再不休息就要挂的时候,腺苷和腺苷受体结合发生各种反应,你的神经细胞活动减弱,随之就产生了睡意.....

接着我们来看看咖啡因这个小碧池都干了些什么!

咖啡因进入机体,与腺苷竞争受体,细胞感知不到腺苷,因此便起到了提神的效果。

咖啡因是一种黄嘌呤生物碱化合物,是一种中枢神经兴奋剂,能够暂时的驱走睡意并恢复精力,临床上用于治疗神经衰弱和昏迷复苏。咖啡因可以让人们保持警觉,在如今这个永不掉线的纷繁世界里,保持警觉是多么重要!

咖啡因可以刺激大脑的快感中心,而且可以使人轻微上瘾。也许正是基于这些功能,咖啡因才被广泛添加于食品、饮料中。适度地使用咖啡因具有舒张血管、促进血液循环、预防高血压、心肌梗塞、利尿、解毒、抗氧化、抗衰老、减肥等药理和生理作用。迅速发展的含咖啡因食品行业已经引起了美国食品及药品管理局(FDA)的关注。尽管FDA尚未对咖啡因采取监管措施,而且认为一天摄入400毫克以下的咖啡因,“通常不会产生危及健康的负面影响”,但FDA目前正在重新考虑开始监管咖啡因,因为各家厂商在许多产品中,加入了高剂量的咖啡因,而且每份产品的量也很大。虽然听起来只有咖啡才像是含有咖啡因的,但各种能量饮料含有多种成分,因此实际效果可能比咖啡更强,像我们最能接触到的可乐也曾一度被爆出咖啡因含量过高。FDA担忧,全天累计摄入咖啡因过多可能导致依赖性。中国更是把提纯后的咖啡因列为“精神药品”管制,属于一种毒品。

目前有关咖啡因检测分析的研究报道不多,为此本文通过使用SPE 1000全自动固相萃取系统对人体血液中咖啡因进行回收率测定分析,探索血液咖啡因样本检测的方法。

关键字:SPE 1000,MV5,血液,咖啡因

1 实验过程


1.1 仪器与试剂

固相萃取仪:SPE 1000全自动固相萃取系统,莱伯泰科公司;

浓缩仪:MV5多通道平行浓缩系统,莱伯泰科公司;

高效液相色谱仪:LC600 二元高压梯度高效液相色谱,莱伯泰科公司;

固相萃取柱:Waters HLB 60mg/3mL ;

咖啡因标准储备液:100μg/mL ;

咖啡因标准工作液:取1mL标准储备液放入10mL容量瓶中,用甲醇定容配置成10μg/mL标准工作液;

甲醇(色谱纯,Fischer 公司);

乙酸乙酯(AR. 北京化学试剂厂重蒸后使用);

磷酸二氢钠(一水)(山东西亚化学工业有限公司);

磷酸氢二钠(无水)(天津市化学试剂六厂);

磷酸盐缓冲液 (pH=6): 12.1g 磷酸二氢钠和 1.75g 磷酸氢二钠溶于 1L 水中;

洗脱液:甲醇:乙酸乙酯=1:1(V:V);

血液替代品:牛血清,市售。

1.2 全自动固相萃取过程

1.2.1 加标样品预处理

取血液样本1mL加入磷酸盐缓冲液1mL平衡,加入50μL标准工作液,混合均匀,加标浓度为500ng/mL,待固相萃取。

1.2.2 固相萃取浓缩过程

将加标样品置于SPE 1000的样品架上,按照图1的固相萃取方法进行血液中咖啡因的萃取净化。洗脱液经MV5在40℃下氮吹浓缩近干后,用流动相定容至1mL 。

图1 血液中咖啡因固相萃取方法

1.3 HPLC-UV分析

色谱柱:Promosil C18,5μm,4.6*150mm;

波长:272nm;

流速:1mL/min;

柱温:40℃;

进样量:20μL;

流动相:甲醇-水= 24:76

2 加标回收率结



2.1 咖啡因标样色谱图

图2 为咖啡因标样的色谱图。

2.2 加标样品色谱图

图3为加标样品的色谱图,图4为空白样品色谱图,得到的加标回收率及平行性结果详见2.3。

图3 加标样品色谱图

图4 空白样品色谱图

2.3 加标回收率结果

通过计算得到该方法中咖啡因的加标回收率及平行性结果(见表1)。咖啡因的加标回收率为95.8~99.2%,平行性RSD 为1.6%。

表1 测定结果

4 结果与讨论


本方法用SPE1000全自动固相萃取系统与MV5多通道平行浓缩系统连用,对血液中咖啡因进行萃取净化,其加标回收率95.8~99.2%,重复性RSD为1.6%。在萃取和浓缩过程中,上样管、收集管和浓缩管是通用的,不需要液体转移,减少损失,便于操作,说明SPE1000与MV5联用适用于血液中咖啡因的检测,操作过程简便并且在回收率和平行性上表现优异。