会员登陆: 用户名:  密码: 验证码:
首页 杂志概况 投稿须知 在线投稿 在线阅读 征订启事 广告服务 行业资讯 企业动态 资料中心  专访报道 会展信息 ENGLISH

在线审稿投稿系统

在线阅读

搜索结果

血清多肽组及其个体差异的纳升液相色谱-高分辨串联质谱分析
孔祥怡 , 石锴 , 丛乐乐 , 王静 , 蒋立军 , 洪晓愉 , 李水明 , 王勇 , 赵晴
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.160309
分析和比较疾病组及健康对照组的混合样品是血清多肽组生物标记物研究的常用方法,但对健康个体多肽组的差异和共性关注较少。本研究利用纳升液相色谱-高分辨四级杆飞行时间质谱鉴定健康人混合血清样品(20例)的多肽组,阐明血清多肽组的分子量分布等一般特征,进而选取6例个体样品单独分析并与混合样品的分析结果进行比较,说明正常健康样品之间的个体差异和共同成分。结果表明,可鉴定序列的血清多肽组的分子量范围在7000 Da以下,纤维蛋白原α链等蛋白质所属肽段的检出频率最高,肽段在蛋白质水平上分布具有不均一性,排在前10%的蛋白质占据了约50%的总肽段,而后40%的蛋白质只有1条检出肽段。此外,在所有样品中都检测到了来自于8个蛋白质的12个共同肽段,检测到了N端乙酰化、氨基酸氧化、磷酸化、脱氨化和脱水等翻译后修饰和明显的阶梯序列现象。本研究在肽段序列水平分析了血清多肽组的基本特征和个体差异,可为血清多肽组生物标志物研究提供参考。
关键词: 多肽组, 高分辨飞行时间质谱, 血清, 个体差异
基于萘酰亚胺的生物硫醇探针的合成及对含硫醇氨基酸的检测
郭靖 , 刘庆文 , 杜建时 , 孔祥怡 , 宋岩 , 杨清彪 , 赵晴 , 李耀先
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.170319
合成了以4-羟基萘酰亚胺为荧光团,2,4-二硝基苯磺酰氧基为特异性识别基团的生物硫醇探针4-(2,4-二硝基苯磺酰氧基)-正丁基-1,8-萘酰亚胺(DNSBN)。吸收光谱和荧光光谱结果表明,DNSBN对半胱氨酸(Cys)、同型半胱氨酸(Hcy)和谷胱甘肽(GSH)3种生物硫醇分子具有高效的检测识别能力,不受其它17种天然氨基酸的干扰。同时,通过荧光滴定实验证实了此探针是一种比率型探针,555 nm处的荧光强度与溶液中的生物硫醇分子浓度在0~20 μmol/L范围内呈良好的线性关系,对Cys、Hcy和GSH的检出限(3σ)分别为25.9、92.0和77.9 nmol/L。而吸收光谱、荧光光谱和质谱表征数据显示,生物硫醇与2,4-二硝基苯磺酸酯发生亲核取代反应并导致磺酸酯的分解。随着识别基团的解离,探针分子的d-PeT(donor-excited photoinduced electron transfer)效应被解除,并出现非常明显的比色与荧光变化。HeLa细胞成像实验表明,探针DNSBN具有良好的生物相容性,能够对细胞外源性生物硫醇分子进行检测。
关键词: 荧光探针, 萘酰亚胺, 半胱氨酸, 同型半胱氨酸, 谷胱甘肽
阿尔兹海默症血清多肽组生物标志物研究
孔祥怡 , 杜建时 , 马明 , 徐金玲 , 李水明 , 王勇 , 赵晴
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.170248
采用个体样品单独分析的方式分析,比较9个健康对照者、10个阿尔兹海默症(Alzheimer's disease,AD)患者和12个认知功能障碍(Mild cognitive impairment,MCI)患者的血清多肽组分析结果,以寻找潜在的AD病生物标志物。结果表明,高强度的α-2-巨球蛋白肽段VGFYESDVMGR与AD病晚期阶段密切相关,而载脂蛋白C-Ⅲ、组蛋白H1.2和组蛋白H1.4的大量降解,则与中早期AD和认知功能障碍相关联;载脂蛋白C-Ⅲ和组蛋白H1的降解肽段具有明显的阶梯序列特征,但在不同样本中的分布具有一定偶然性。AD病发展的晚期与中早期的血清多肽组特征不同,这4种蛋白质的降解有可能成为AD病潜在的生物标志物。研究结果也证明了,归属于纤维蛋白原α链、胸腺素β-4和斑联蛋白等蛋白质的肽段是所有血清样本中的优势肽段。本研究提出了利用血清多肽组学方法辅助诊断AD病的方法,为临床大规模验证提供了依据和参考。
关键词: 多肽组, 生物标志物, 血清, 阿尔兹海默症, 认知功能障碍