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脂质体荧光探针检测磷脂酶C的活性
谷巧荣 , 艾俊杰 , 张倩云 , 董雅男 , 高强
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.170179
建立了一种以荧光标记脂质体为探针检测磷脂酶C(PLC)活性的新方法。此荧光探针是由二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)和丽丝胺罗丹明B标记的荧光磷脂(Liss Rhod PE)通过自组装形成有序的荧光标记脂质体,探针脂质体中Liss Rhod PE由于相互之间距离靠近产生自猝灭效应,因而作为探针的脂质体并不表现出荧光性质。当在此探针溶液中加入目标物PLC,PLC可以水解切割标记在磷脂酰基二位上的荧光团罗丹明,使其从脂质体释放到溶液中,导致自猝灭效应的减弱,溶液荧光信号增强,以此实现对PLC活性的检测。使用此探针检测PLC活性,荧光强度的增加值与PLC浓度在5~300 U/L范围内呈良好的线性关系,检出限为2 U/L(S/N=3)。此外,此探针还可用于PLC抑制剂的筛选。
关键词: 荧光, 脂质体, 探针, 磷脂酶C, 抑制剂