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石墨相氮化碳光诱导活化辣根过氧化物酶及其比色免疫分析应用
张岚 , 李小琴 , 王光丽
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201065
基于石墨相氮化碳(g-C3N4)在可见光(λ≥400 nm)照射下可激活辣根过氧化物酶(HRP),使HRP能够催化氧化特征底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB),设计了一种新型夹心型免疫传感器,用于高灵敏检测甲胎蛋白(AFP)。此夹心型免疫传感器利用附着于微孔板上的一抗(Ab1)捕获目标物AFP,然后与HRP和二抗(Ab2)共同标记的金纳米颗粒(Ab2-AuNPs-HRP)反应,并结合酰胺放大技术(TSA),增大表面固定的HRP的量,实现信号放大。加入g-C3N4后,在可见光照射下,HRP的活性被激发,TMB被氧化后的信号(即652 nm处的吸光度)与AFP的浓度在0.5 pg/mL~0.1 μg/mL范围内呈线性关系,检出限(LOD,S/N=3)为0.17 pg/mL。 本研究构建的新型免疫传感器具有灵敏度高、选择性好、使用方便等优点,在实际样品测定中具有潜在的应用价值。
关键词: 石墨相氮化碳, 辣根过氧化物酶, 活化, 免疫分析