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西马特罗分子印迹荧光检测试纸条的研制
张连明 , 黄小云 , 张英明 , 李建平 , 张兰 , 曾英
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.160204
将分子印迹技术良好的选择性与试纸条快速检测的特点相结合,研制了一种快速检测西马特罗的分子印迹试纸条。以西马特罗为模板分子,化学聚合法制备西马特罗分子印迹聚合物,将其附着在硝酸纤维素膜上。洗脱模板分子后,裁剪压制得到分子印迹试纸条。试纸条识别样品中西马特罗后,滴加荧光物质曙红Y,根据反应区内西马特罗与曙红Y反应后荧光猝灭程度对西马特罗进行分析。研究结果表明,在0.01-100 μg/mL浓度范围内,荧光猝灭程度随着西马特罗浓度的增加而增大,最低检测浓度为0.01 μg/mL。此试纸条制备简单,操作简便,可用于现场检测。将其用于猪肉和饲料样品中西马特罗的快速测定,结果令人满意。
关键词: 试纸条, 分子印迹, 西马特罗, 荧光, 曙红Y
基于G-四联体门控制效应的铅离子适配体传感器
邓欢 , 孙觅 , 魏小平 , 黎洪增 , 李建平
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.150314
将富鸟嘌呤(G)序列核酸适配体与门控制效应相结合,通过控制门的开关实现信号放大,构建了新型电化学生物传感器,用于铅离子(Pb2+)的高灵敏检测。首先将单-6-巯基-β-环糊精(6-SH-β-CD)自组装在金电极上,形成有序排列的分子自组装膜,且分子之间留有空隙,可作为探针通过的门结构。随后将发夹结构的富含G序列的核酸适配体修饰在环糊精次面端口,制得可特异性识别Pb2+的电化学生物传感器。富G序列适配体结合Pb2+后可折叠形成G-四联体结构(G4-Pb2+),覆盖住电极表面的探针通道,产生关门效应,使探针氧化还原电流强度减小,进而形成门控制效应,利用该效应可进行Pb2+的定量检测。门控制效应显著提高了信噪比和检测的灵敏度,在1×10-13~5×10-11mol/L浓度范围内,Pb2+浓度的负对数与DPV响应电流呈良好的线性关系,检出限为3.6×10-14mol/L(DL=3δb/K)。传感器用于实际水样品中Pb2+的测定,结果令人满意。
关键词: 电化学传感器, 门控制, G-四联体, 二价铅离子
基于切刻内切酶信号放大的电致化学发光DNA生物传感器的研究
海洪 , 黄文刚 , 梁顺超 , 李建平
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.150742
利用切刻内切酶的酶切作用实现信号放大,结合量子点高效的电化学发光性能,构建了一种新型电化学发光DNA生物传感器。将捕获探针DNA(c-DNA)通过自组装的方式固定到金电极表面,后与目标DNA(t-DNA)互补杂交形成双链DNA,利用切刻内切酶Nt.BstNBI特异性识别双链上的酶切位点(5'-GAGTC-3'),然后在c-DNA相应的切割位点(识别序列3'端后的4个碱基处)对其进行剪切,释放出目标链,参与下一轮的杂交及酶切,通过目标物的循环利用,实现信号放大。利用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-3-二甲基氨丙基碳化二亚胺(EDC)活化羧基化CdTe量子点表面的羧基,与电极表面残留的c-DNA末端的氨基共价交联,通过测定捕获的量子点的电化学发光信号对目标DNA进行检测。优化后的检测条件为:c-DNA浓度1μmol/L,杂交时间60 min,Nt.BstNBI浓度0.5 U/μL,酶切反应时间4 h。在优化条件下,目标DNA浓度在2.0×10-13~2.0×10-11 mol/L范围内,其对数与电化学发光强度呈线性关系,检出限为7.3×10-14 mol/L。人体血样加标回收率为96.4%~108.0%。
关键词: DNA生物传感器, 切刻内切酶, 量子点, 电致化学发光, 信号放大
基于抗原决定基的胰岛素分子印迹电化学传感器
赵成军 , 马雄辉 , 李建平
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.170256
采用抗原决定基法制备了胰岛素电化学分子印迹传感器。以胰岛素C端多肽作为模板分子,定向自组装在Au电极上,以邻苯二胺为功能单体,电化学聚合制备分子印迹聚合膜。以NaOH为洗脱液,洗脱模板分子,形成的与胰岛素C端多肽三维结构相匹配的分子印迹孔穴能特异性识别胰岛素。重吸附胰岛素分子后,以K3[Fe(CN)6]/K4[Fe(CN)6]为探针,通过测量探针在电极表面产生的电流大小实现胰岛素的间接测定。在1.0×10-14~5.0×10-13 mol/L浓度范围内,传感器的电流响应值与胰岛素浓度呈良好的线性关系,检出限为7.24×10-15 mol/L(3σ)。此传感器具有较好的选择性和稳定性,并成功用于血清样品中胰岛素的测定。
关键词: 胰岛素, 分子印迹, 电化学传感器, 抗原决定基法