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基于快速高分辨液相色谱-质谱的中波紫外线辐射诱导大鼠急性光损伤的代谢组学研究
王恩鹏 , 孙岩 , 越皓 , 陈焕文 , 王洋 , 陈长宝 , 刘淑莹
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.160113
利用快速高分辨液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF-MS)联用技术结合多元统计分析方法,考察在中波紫外线(Ultraviolet B,UVB)辐射前后,大鼠尿液中内源性代谢物谱的变化,研究UVB辐射导致急性光损伤的生理机制。急性光损伤大鼠模型由窄谱中波紫外线光源(TL-01,峰值312 nm)照射,采用离心沉降后四倍稀释法处理尿液样本,Supelco Ascentis® Express C18色谱柱,水(含0.1%甲酸)与乙腈为流动相梯度洗脱,液相色谱-串联质谱分析测定。利用主成分分析(PCA)法、聚类分析(CA)法等对辐射前后的大鼠尿液样本进行代谢轮廓分析,寻找对分组贡献大的差异代谢物及通路,并阐明其作用机制;运用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法建立预测模型,考察此模型在UVB致光损伤模型诊断上的预测能力。多元统计分析结果显示,空白对照组与UVB模型组能够获得很好地区分,通过将差异代谢物与数据库、串联质谱数据及标准品比对,发现并鉴定出11种潜在生物标记物,表明UVB辐射可影响正常大鼠的鞘脂类代谢、核酸代谢、亚油酸代谢、氨基酸代谢等通路,这些差异代谢物对UVB辐射致光损伤类疾病的诊断具有较好的预判能力。
关键词: 代谢组学, 中波紫外线, 辐射, 快速高分辨液相色谱-四极杆-飞行时间质谱
基于对铂纳米粒子过氧化物模拟酶活性的抑制检测碘离子
路丽霞 , 王洋 , 蔺晓晓 , 李欣瑶 , 辛梦娜
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171220
合成了柠檬酸钠保护的铂纳米粒子(PtNPs),其具有类过氧化物酶活性,可催化四甲基联苯胺(TMB)和过氧化氢的反应,产生有色产物;而碘离子(I-)对铂纳米粒子的催化活性具有明显的抑制作用,一定范围内随着I-浓度的增加,抑制作用逐渐增强,基于此构建了一种简单、快速测定I-的比色传感方法。I-的肉眼识别可在几秒内完成,定量检测可在10 min之内完成。此方法灵敏度高,检出限为8 nmol/L,检测范围较宽,为20~5000 nmol/L。相对于以纳米粒子的聚沉-分散为基础的比色法,此方法不需要纳米粒子的表面修饰,没有复杂的有机合成过程,操作简便、成本低。将此方法成功用于实际食盐样品和水样中I-的检测,效果良好。
关键词: 铂纳米粒子, 过氧化物模拟酶活性, 碘离子, 催化活性
表面接枝法制备睾酮素分子印迹表面等离子体共振传感器
景丽静 , 王洋 , 韦天新
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.151031
构建了一种选择性检测睾酮素的分子印迹表面等离子体共振(Surface plasmon resonance,SPR)传感器。采用紫外光引发表面接枝技术,在固定引发转移终止剂的SPR芯片表面制备了以睾酮素为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂的分子印迹膜(Molecularly imprinted film,MIF)。利用SPR在目标共振角处现场监测使MIF聚合成膜过程更易控。偏振调制-红外反射吸收光谱表征证明MIF接枝成功。原子力显微镜结果显示,MIF表面均匀散布着纳米尺寸的孔穴。利用SPR对2.5×10-16~2.5×10-6 mol/L睾酮素进行吸附检测,检出限低至2.5×10-16 mol/L,对低浓度和高浓度的睾酮素吸附分段进行线性拟合,得到拟合线性方程分别为y=19.69+1.21xR2=0.9913)和y=11.5+0.45xR2=0.9895);睾酮素类似物雌二醇、雌三醇和黄体酮的吸附实验结果显示,此印迹膜对模板分子有很好的选择性;5次重复洗脱吸附后,MIF仍保持较好的传感性能,说明此传感器具有较高的稳定性和重复利用性;在人工尿液样品中测得的睾酮素回收率为85.2%~92.8%,说明此传感器可以用于实际样品测定。
关键词: 表面等离子体共振, 分子印迹膜, 睾酮素, 表面接枝