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化学发光免疫分析法检测血清中前列腺特异抗原复合物
周友俊 , 李娇霞 , 程绘珺 , 杨乔芬 , 何美琼 , 郭丽萍 , 邓智勇
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.150937
采用杂交瘤技术构建抗前列腺特异抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶(Prostate specific antigen-α1-antichymotrypsin complex,PSA-ACT)单克隆抗体(单抗)细胞株,共获得8株稳定分泌PSA-ACT单抗的细胞株,纯化后进行免疫特性鉴定并做单抗配对。选择其中一对单抗,采用辣根过氧化物酶(HRP)催化鲁米诺(lumino)-H2O2化学发光体系,建立了测定人血清中PSA-ACT浓度的化学发光酶免疫分析方法(CLEIA)。对包被缓冲液、包被抗体浓度、酶标抗体稀释度、温育时间、发光反应时间和免疫反应步骤等实验参数进行了优化。在最佳实验条件下,PSA-ACT浓度在5~40 ng/mL范围内线性关系良好(R2=0.9943),检出限为0.53 ng/mL,批内相对标准偏差(RSD)为4.6%~6.6%,批间RSD为5.7%~8.0%,回收率为95.4%~104.2%,与游离前列腺特异性抗原F-PSA的交叉反应率为0.6%。本方法简单、稳定、灵敏、快速,为开发检测PSA-ACT的CLEIA试剂盒奠定了基础。
关键词: 前列腺特异抗原, 前列腺癌, 化学发光酶免疫分析, 辣根过氧化物酶
分散液液微萃取-气相色谱法快速测定水中15种硝基苯类物质
杜小弟 , 李俊升 , 郭丽萍 , 雷家珩
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171160
建立了分散液液微萃取-气相色谱电子捕获检测器测定水中15种硝基苯类物质的方法。筛选出了具有高密度且能够适用于电子捕获检测器的萃取剂。优化了色谱条件,对萃取剂种类及用量、分散剂种类及用量、萃取时间、萃取温度等条件进行了优化。DB-35毛细管柱对15种硝基苯类物质具有最好的分离效果。使用程序升温,初始80℃保持2 min,以5℃/min速率升温至180℃,可以在22 min内完成分离。以100μL氯苯作为萃取剂、400μL甲醇作为分散剂,对5.00 mL水样在室温下进行萃取,仅需30 s即可达到萃取平衡,15种目标物的萃取率均可达到90%以上,富集倍数达到45.0-48.8。离心分离,取下层沉积相进行气相色谱测定,使用电子捕获检测器检测,方法的定量限为0.03-0.15μg/L,线性范围为0.20-50.0μg/L,相关系数不低于0.998。方法的相对标准偏差在3.3%-8.9%之间,加标回收率在86.0%-103.5%之间。
关键词: 气相色谱, 分散液液微萃取, 硝基苯类, 饮用水