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基于微流控芯片的尿路感染细菌鉴定及抗生素敏感性测试
齐明月 , 杜燕 , 刘未平 , 陈斌 , 梁广铁 , 徐邦牢 , 刘大渔
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.160035
发展了一种微流控芯片纸基细菌分析技术,用于多重细菌鉴定与抗生素敏感性测试。制备了阵列培养池芯片,以滤纸作为衬底固定显色培养基和抗生素。利用PVDF疏水薄膜止流阀,将尿液样品引入芯片并分隔于不同培养池。借助于培养池阵列的空间分辨力,实现多重细菌分析。根据特异性显色结果实现细菌鉴定,通过实时显色强度分析实现细菌定量,依据抑制显色反应的最低抗生素浓度确定抗生素敏感性。以3种泌尿系统感染常见病原菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌)为模拟测试对象进行分析,结果表明,芯片方法可以在18 h内实现对3种细菌的同时鉴定及6种抗生素敏感性测试。对照实验显示,芯片法与传统方法细菌鉴定和抗生素敏感性测试结果一致性分别为94.1%和93.9%。本研究建立的微流控芯片细菌分析方法简便快速,非常适合于医疗资源匮乏条件下的细菌分析。
关键词: 微流控芯片, 细菌鉴定, 抗生素敏感性测试, 快速检测
金属离子与氨羧类螯合配体的键合特性研究
陈斌 , 王石慧 , 李蓉 , 樊安
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.170154
利用前沿色谱法,通过Cu2+、Ni2+和Co2+与螯合配体IDA键合的准确度(R2>0.98)与精密度(RSD < 5%)实验,研究了前沿色谱法同时测定络合稳定常数KML与总键合位点数Λ0值的可行性。为了进一步证明前沿色谱法的普适性,以Cu2+、Ni2+和Co2+为代表,在3种键合缓冲体系(NaAc-HAc、Na-PB、Tris-HCl)中,考察了金属离子在3种氨羧类螯合配体(IDA、Asp、Glu)上络合稳定常数KML的变化规律。结果表明,螯合配体对金属离子键合强度遵循IDA > Asp > Glu;金属离子对螯合配体键合强度遵循Cu2+>Ni2+>Co2+;3种键合缓冲体系中,NaAc-HAc键合效果最好。按照M06/6-311++G(d,p)方法对螯合配体与金属离子的结合能(ΔE)与吉布斯自由能(ΔG)进行相关的量子计算。根据ΔE与ΔG的大小,从理论上推测出螯合配体与金属离子的键合规律,此规律与上述实验结果基本相符。本研究为金属离子与螯合配体间键合参数的求取提供了有效的方法和手段,从而为今后提高IMAC柱的稳定性,解决固定金属亲和柱在应用过程中尤其是竞争洗脱过程中金属离子的流失问题奠定了良好的基础。
关键词: 前沿色谱法, 量子计算, 氨羧类螯合配体, 络合稳定常数, 总键合位点数