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论文(4)

基于液相色谱-串联质谱技术的新疆一枝蒿植物代谢组学分析方法研究

陈路路 , 王中华 , 周帜 , 何秉淑 , 贺玖明 , 黄罗娇 , 努尔波拉提·阿依达尔汗 , 刘戈宇 , 阿吉艾克拜尔·艾萨 , 再帕尔·阿不力孜

doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171489

药用植物化学成分种类繁多、结构复杂，而传统方法难以获得全面反映其所含成分随时间、品种和生态环境等因素发生的变化信息，因此需要建立系统、全面的分析方法以进行整体物质基础研究。本研究开展了基于液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术的新疆一枝蒿植物代谢组学分析方法研究，并将其应用于该植物不同组织器官代谢组的差异分析。重点考察了样品前处理过程中的提取溶剂及比例、复溶溶剂比例、超声时间对非靶向代谢组学研究的影响，以代谢物覆盖度为主要指标选择了最优条件并进行了方法学验证。采用上述前处理方法和LC-MS/MS分析方法，获得了新疆一枝蒿根、茎、枝、叶、花不同组织器官的代谢组信息，并构建多变量统计模型进行分析，发现花与其它组织器官的代谢组存在显著差异。结合数据库检索与化合物质谱裂解规律分析，获得差异代谢物的结构类型，包括61个黄酮类、97个一枝蒿酮酸衍生物、7个绿原酸类化合物及15个其它类型化合物。进一步采用聚类热图分析针对上述180个差异代谢物在各组织器官的分布情况进行表征，初步揭示了各类化合物在不同组织器官的分布特征。本研究不仅为新疆一枝蒿植物化学成分的组织器官分布及其有效成分的合理利用提供了重要信息，同时为药用植物的质量控制、品种改良以及合理开发提供了新的研究策略。

关键词: 新疆一枝蒿, 液相色谱-串联质谱, 植物代谢组学, 样品前处理, 多变量统计分析

大肠杆菌胞内代谢物组学分析样品前处理条件优化

李阳 , 王继彤 , 刘晓露 , 田静 , 贾铮 , 肖志明 , 樊霞

doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191172

建立了适用于大肠杆菌胞内代谢物组学分析的样品前处理条件。大肠杆菌菌体细胞采用冷冻盐水（0.85% NaCl，-80℃预冷15 min）进行猝灭，猝灭后的菌体细胞经过真空冷冻干燥，再通过液氮冷冻研磨结合超声裂解的方式通透细胞膜，最后采用冷甲醇-水（MeOH-H₂O，1：1，V/V，4℃）提取胞内代谢物。分别采用流式细胞术检测和OD值回收率从单细胞水平和整体水平评价猝灭溶剂对大肠杆菌细胞膜损伤影响。结果表明，采用冷冻盐水猝灭大肠杆菌细胞损伤率小于5%。采用液相色谱-飞行时间质谱（T₃和Hilic 2种色谱分离结合ESI±扫描模式）检测结果中低碰撞能量提取出的峰数量和总离子强度评价了3种细胞通透方式和4种提取溶剂组合的胞内代谢物提取效果。结果表明，冷冻研磨结合超声裂解通透细胞膜、冷甲醇-水提取代谢物测得的代谢物数量最多（≥ 10⁵），并且总离子强度在最优范围（10⁶~10⁷）内。本研究采用冷冻干燥、冷冻研磨和超声萃取相结合的代谢物提取方式，有效促进了细胞膜裂解，提高了代谢物提取效率。本研究建立的前处理条件适用于大肠杆菌胞内代谢物组学分析。

关键词: 大肠杆菌, 胞内代谢物, 组学分析, 样品前处理

共价有机框架材料在色谱分离、光学传感与样品前处理中的应用

魏欣 , 陈佳 , 关明 , 邱洪灯

doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191369

共价有机框架材料（COFs）是由轻质元素通过共价键连接而成的具有结晶性的高分子化合物，作为一类新型有机多孔材料，其具有密度低、比表面积大、孔径可调和易功能化等特点，引起了研究者的极大兴趣。目前，COFs已在储气、催化和药物输送等方面取得了突出的成果。本文主要综述了近三年来COFs在色谱分离、光学传感及样品前处理方面的最新研究进展，并对其发展前景进行了展望。

关键词: 共价有机框架材料, 色谱固定相, 光学传感, 样品前处理, 评述

基于整体柱的糖基化蛋白质分离富集方法的研究进展

温雪 , 郑海娇 , 张扬 , 贾琼

doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191566

蛋白质糖基化作为一种重要的翻译后修饰，不仅可以反映机体的健康状况，还可以充当药物治疗的靶点。因此，阐明蛋白质糖基化的修饰规律对疾病的诊断和治疗具有重要意义。然而，生物样品中糖基化蛋白质相对丰度低，复杂程度高，动态范围宽，适宜的样品前处理步骤必不可少。近年来，整体柱因具备分离快速、灵敏、高效、生物兼容性好等优点，在糖基化蛋白质分离富集领域得到了广泛关注。本文对近年来基于整体柱的糖基化蛋白质分离富集方法的研究进展进行了评述，并对其未来发展趋势进行了展望。

关键词: 整体柱, 糖基化蛋白质, 样品前处理, 分离, 富集, 评述