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纳米金-适配体比色传感法检测玉米油中黄曲霉毒素B1
杨妍 , 尹盈爱 , 董益阳
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191728
黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是真菌或霉菌产生的有毒代谢物,通过污染农作物和食品从而对人体健康造成严重威胁。本研究建立了纳米金(AuNPs)-适配体比色传感法,采用不同序列长度的AFB1适配体检测玉米油中AFB1。通过优化适配体浓度、NaCl浓度和体系反应温度,进一步提高体系检测灵敏度。在最佳条件下,50(B50)和80(A80)个碱基长度的适配体建立的AuNPs-适配体比色传感法的检出限分别为13.55和10.56 ng/mL,线性范围均为20~1000 ng/mL,且选择性良好。基于B50和A80适配体比色传感法检测玉米油中AFB1的加标回收率分别为102.4%~104.9%和98.1%~109.1%。结果表明,基于B50和A80建立的AuNPs比色传感法均可用于玉米油中AFB1特异性鉴定。本研究为现场快速检测和高效筛查食品中AFB1污染提供了技术支持,为开发针对其它靶标的适配体传感检测方法奠定了基础。
关键词: 黄曲霉毒素B1, 适配体, 纳米金-适配体比色传感法, 玉米油
核酸适配体亲和柱净化-高效液相色谱法测定莲子中黄曲霉毒素B1
赵颖 , 王楠 , 高华龙 , 郭子轩 , 陆安祥 , 郭晓军 , 卢静华 , 栾云霞
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201030
以特异性的核酸适配体作为识别元件,制备了黄曲霉毒素B1 (AFB1)的适配体亲和柱(AAC),用于AFB1的特异性识别和富集。对AAC的载样液中有机溶剂含量、载样液的体积和淋洗体积等条件进行了优化。此AAC吸附AFB1的柱容量达到(334.6±18.2) ng,且AAC可重复使用20次。莲子样品经AAC净化富集后,用高效液相色谱-光化学衍生荧光法检测,外标法定量,AFB1检出限达到0.05 ng/mL,回收率为91.8%~108.6%。本方法为食品、农产品和中药等复杂基质中痕量毒素的提取富集和分析提供了新的参考,具有良好的应用前景。
关键词: 适配体亲和柱, 黄曲霉毒素B1, 固相萃取, N-羟基硫代琥珀酰亚胺活化的琼脂糖, 莲子
热处理碳纳米管耦合维生素B12作为氧还原反应电催化剂的性能分析
段广彬 , 房雅婷 , 董凯 , 姜媛媛 , 陈传霞 , 倪朋娟 , 逯一中
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181788
开发成本低廉、性能优良的阴极氧还原电催化剂,替代昂贵的铂基催化剂,一直是燃料电池研究中的热点和难点,也是实现燃料电池商业化的关键之一。碳纳米材料负载过渡金属大环配位分子作为氧还原催化剂具有成本低、活性较高、导电性能好、稳定性高等优点。本研究利用维生素B12(VB12)中心的Co-Nx环状结构,以VB12作为活性位点的前驱体,以碳纳米管(CNT)为碳载体,通过高温热解制备了CNT-VB12复合材料。对此复合材料的形貌和组成进行了表征,并对其在碱性条件下的氧气还原电催化活性、稳定性及抗干扰性进行了分析。结果表明,CNT-VB12材料表现出高的氧还原反应(ORR)电催化活性。动力学研究结果表明,此复合材料通过几乎完全的4电子转移过程催化氧气还原为水,并且具有优于商业Pt/C的抗甲醇干扰性及稳定性,是一种有良好实际应用前景的燃料电池非贵金属氧还原电催化剂。
关键词: 碳纳米管, 维生素B12, 氧还原反应, 电催化剂
人参皂苷Re在正常和中波紫外线辐射损伤模型大鼠体内药代动力学比较研究
孙岩 , 肖楠 , 李光 , 韩燕燕 , 刘淑莹 , 王恩鹏 , 陈长宝
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171136
建立了超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-QQQ-MS)检测大鼠血浆中G-Re含量的方法,用于比较研究人参皂苷Re(Ginsenoside Re,G-Re)在正常大鼠和UVB辐射损伤模型大鼠体内的药代动力学行为。选用Ascentis® Express C18色谱柱(5.0 mm×3.0 mm,2.7 μm),以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱。电喷雾离子源(ESI)在负离子模式下,选择多反应监测模式(MRM)扫描,内标法定量,用于G-Re定量分析的离子为m/z 991.54/945.53/475.60。方法检出限为4.0 ng/mL,定量限为13.5 ng/mL,G-Re在15~20000 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999);日内和日间精密度、回收率、基质效应和稳定性均能满足药代动力学分析要求。结果表明,两组大鼠分别单次口服50 mg/kg G-Re后,体内代谢过程表现皆符合二室模型特征,正常组和模型组t1/2α分别为(0.21±0.04)h和(0.69±0.07)h,t1/2β分别为(17.08±0.53)h和(21.40±16.77)h,AUC(0-t)分别为(321.91±2.27)μg/(L·h)和(474.99±194.96)μg/(L·h),AUC(0-∞)分别为(332.44±1.66)μg/(L·h)和(518.64±231.39)μg/(L·h),除t1/2α外,两组之间的药代动力学参数具有显著差异(p < 0.05)。本方法准确、灵敏、专属性强、稳定性好,可用于人参皂苷Re的体内药代动力学比较研究。
关键词: 人参皂苷Re, 中波紫外线辐射, 药代动力学
新型氯霉素化学发光芯片免疫检测方法的建立及应用
任帅 , 丁乔棋 , 李丽 , 邵漫雨 , 宋素泉 , 闫丽萍
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.181189
采用氯霉素(CAP)全抗原CAP-HS-BSA免疫新西兰兔,获得抗CAP多克隆抗体,测得效价为2×105,此抗体与CAP结构类似物的交叉反应率均小于0.01%,特异性良好。在此基础上,分别建立了特异性检测氯霉素残留的间接竞争酶联免疫吸附法(ic-ELISA)和基于iPDMS膜的化学发光芯片免疫检测法,并用于实际牛奶样品中CAP的检测。建立的ic-ELISA法的半数抑制浓度(IC50)为12.9 ng/mL,线性检测范围(IC20~IC80)为0.8~250.0 ng/mL,检出限(IC10)为0.1 ng/mL,回归方程B/B0=-0.2028lgCCAP+0.7281(R2=0.9926)。牛奶样品中加标回收率为81.8%~97.9%,相对标准偏差(RSD)小于10%。建立的化学发光芯片免疫检测方法的半数抑制浓度为263.0 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为1~5000 ng/mL之间,检出限(IC10)为1 ng/mL,回归方程B/B0=-0.1781 lgCCAP+0.9318(R2=0.9891),牛奶中CAP的加标回收率为77.0%-100.5%,RSD < 15%。
关键词: 氯霉素, 多克隆抗体, 间接竞争酶联免疫分析, 化学发光, 芯片免疫
二氧化碳浓度对鸡蛋呼吸强度及品质的影响
马逸霄 , 王巧华 , 王贤波 , 施行
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201361
为了明确贮藏环境中二氧化碳(CO2)浓度对鸡蛋品质的影响,将鸡蛋贮藏在CO2浓度分别为0.03%(空气)、5%、10%和20%的贮藏箱内(分别记为A组、B组、C组和D组),探究CO2对鸡蛋呼吸强度与新鲜度的影响,分析鸡蛋品质各指标值与呼吸强度之间的灰色关联度,为鸡蛋的贮藏、运输与保鲜提供理论支持。结果发现,B组、C组和D组鸡蛋呼吸被抑制,呼吸强度较弱,A组呼吸强度随贮藏时间延长而由强逐渐变弱;哈夫单位和蛋黄指数下降速率为A组 > B组 > D组 > C组,B组、C组和D组保质期均长于A组;贮藏过程中,A组pH值高于另外3组;A组在第5天后出现菌落,另外3组均在15天后出现菌落,A组贮藏45天的菌落总数约为另外3组的60倍。研究表明,鸡蛋在CO2浓度为5%、10%、15%的贮藏环境中,呼吸强度被抑制,有抑菌保鲜的效果;通过灰色关联度分析发现,哈夫单位、蛋黄指数和pH值与呼吸强度的关联度较强,菌落数对呼吸强度影响较小;对比各种贮藏效果发现,CO2浓度为10%与20%的贮藏组保鲜抑菌效果相近,均优于CO2浓度为5%与0.03%的贮藏组,结合经济适用角度,最适宜鸡蛋贮藏保鲜的CO2浓度为10%。
关键词: 鸡蛋, 贮藏, 保鲜, 二氧化碳, 呼吸强度
鹿角珊瑚硼同位素组成与海水表面pH值的相关性研究
张艳灵 , 肖应凯 , 马云麒 , 刘志启 , 王俊林 , 刘玉秀
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181516
采用串联式水循环系统和插孔式新生长珊瑚培植方法,在保证珊瑚正常生长水化学条件基本一致的条件下,进行了不同海水pH值环境下的鹿角珊瑚养殖实验。采用热电离同位素质谱仪测定了珊瑚的硼同位素组成,以探讨珊瑚硼同位素组成与海水pH值的经验关系。珊瑚和海水B(OH)3间的硼同位素分馏系数αcarb-3与养殖海水pH值的关系研究结果表明,αcarb-3不是常数,而是与pH值有关,表明B(OH)3同时掺入进珊瑚生物碳酸盐。通过实验数据获得的δ11Bcarb-pH经验方程可用于海水pH值的计算与分析,从而可替代存在争议的采用理论公式由测定的珊瑚生物碳酸盐的δ11Bcarb值进行海水pH值计算的方法。另外,在珊瑚养殖过程中,高pH值养殖水箱中有CaCO3和Mg(OH)2混合沉淀析出,其δ11B值明显高于养殖海水,表明Mg(OH)2的存在对硼同位素分馏有显著影响,这是否会对珊瑚的硼同位素组成产生影响值得关注。
关键词: 硼同位素, 分馏系数, pH值, 氢氧化镁, 珊瑚养殖
乙二胺四乙酸二钠用于沉积物酸溶相中高精度硼同位素测定方法研究
杨剑 , 马云麒 , 李兴意 , 刘玉秀 , 韩风清 , 张艳灵 , Syed Asim Hussain , 李海军
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191113
采用传统的酸溶法进行沉积物样品(包括粘土样品或碳酸盐等样品)硼同位素测定的前处理过程中,酸通常会溶解出样品中大量Ca2+、Fe3+、Mg2+、Al3+等金属离子以及稀土元素。由于前处理过程中溶出的硼只有在碱性环境中才能被硼特效树脂有效地吸附,而大量共存的Ca2+、Fe3+、Mg2+、Al3+等金属离子在碱性条件下会产生难溶于水的氢氧化物沉淀,进而会造成硼的丢失和同位素分馏。本研究在沉积物酸溶相样品中加入适量EDTA-2Na饱和溶液,再将样品溶液调成碱性,能有效抑制沉淀的产生。用氨水淋洗吸附后的硼特效树脂,并延长样品电离时间,能有效降低EDTA-2Na对硼同位素测定的干扰,从而达到样品中硼元素的高效提取和硼同位素组成的准确测定。结果表明,样品加入EDTA-2Na饱和溶液后硼的回收率可达到95%以上。同时,经过处理后的NIST SRM 951硼酸标准样品的11B/10B比值在4.05146~4.05628之间;三亚沉积物、大柴旦湖心沉积物和大柴旦湖心晶间卤水沉积物的硼同位素组成(δ11B)分别为+17.64‰、-5.74‰和+1.8‰。本方法可满足沉积物样品(如粘土沉积物、碳酸盐沉积物、黄土、古土壤等样品)酸溶相中硼同位素组成高精度测定的要求,为此类样品的高精度硼同位素测定提供了一种简单、低干扰的前处理方法。
关键词: 沉积物酸溶相, 氢氧化物沉淀, 乙二胺四乙酸二钠, 硼同位素, 热电离质谱
极紫外光刻胶产气的定性和定量检测
陈金平 , 郝青山 , 王双青 , 杨树敏 , 赵俊 , 吴衍青 , 曾毅 , 于天君 , 杨国强 , 李嫕
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201366
利用压强升高法建立了极紫外(Extreme ultraviolet,EUV)光刻胶产气检测系统,对以分子玻璃(Molecular glass)螺芴(9,9'-Spirobifluorene,SP)为主体材料的光刻胶薄膜体系Film A、B、C和D进行产气的定性和定量分析,其中,Film A的主体材料外围取代基团为叔丁氧羰基(t-Butylcarbonyl,Boc),Film B和C是在Film A光刻胶薄膜顶层覆盖不同厚度的保护层,Film D的主体材料外围取代基团为醋酸金刚烷酯(Adamantyl acetate,Ad)。采用四极杆质谱检测光刻胶薄膜在EUV曝光条件的产气组分,结果表明,Film A产气的主要来源为光照产生的酸催化光刻胶主体材料脱Boc取代基反应释放的异丁烯(C4H8)和CO2气体,以及少量由于产酸剂(Photo-acid generator,PAG)分解释放的苯类挥发性组分。覆盖保护层的Film B、C产气成分与Film A类似,但各离子峰的丰度明显降低。Film D的质谱图上显示气体释放成分为CO2和极微量的金刚烷类取代基的碎片峰。通过高精度真空规定量分析不同薄膜的产气量,原位实时检测结果表明,光刻胶薄膜产气速率在曝光初始阶段最快,而后逐渐变缓或趋于稳定,表明光刻胶薄膜表面的分子在EUV光照更容易释放气体。对比Film A和Film B、C体系发现,顶层覆盖可以显著降低光刻胶的产气速率和产气量,增加顶层覆盖厚度,抑制产气效果更明显,在Film A顶层覆盖厚度30 nm的保护层,10 mJ/cm2曝光剂量下,产气量从1.19×1015 molecule/cm2降低到2.35×1014 molecule/cm2,降低了约5倍,证明顶层覆盖是降低光刻胶薄膜产气的有效方法。不同取代基团的主体材料形成的光刻胶薄膜Film D和Film A在EUV曝光中的产气差别明显,Film D的产气速率和产气量比Film A降低了10倍以上,表明光刻胶主体材料的外围取代基团对光刻胶薄膜的产气量具有显著影响,更大分子量和更高脱保护反应活化能的取代基团有助于降低光刻胶薄膜的产气量。
关键词: 光刻胶, 产气, 分子玻璃, 极紫外, 光刻
“自上而下”高分辨串联质谱法分析德谷胰岛素的序列
王建伟 , 赵莉 , 田圃
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201138
基于"自上而下"的序列分析策略,采用高分辨串联质谱法对德谷胰岛素的氨基酸序列及B链C末端侧链非蛋白修饰序列进行了全面的分析。优化了德谷胰岛素的还原条件及串联质谱的碰撞条件,结果表明,联合使用50 mmol/L三(2-羧乙基)膦及6 mol/L盐酸胍,在45℃下反应40 min即可充分还原德谷胰岛素为两条独立的肽链;还原产物经Accucore C18色谱柱分离,采用静电场轨道阱高分辨串联质谱分析,当高能碰撞诱导裂解能量分别为20(A链)与25(B链)时,可获得最丰富的质谱碎片信息,可满足生物技术药物质量评价中100%的序列覆盖率的基本要求,亦可对问题样品提供更全面的序列解析。此方法未使用传统序列分析中昂贵且费时的测序级蛋白内切酶,降低了引入人为修改的风险,以更准确地获得序列信息,节约了成本,并显著提高了工作效率,为胰岛素类似物的序列分析提供了新的解决方案。
关键词: 超高效液相色谱-高分辨串联质谱, 高能碰撞诱导裂解, 德谷胰岛素, “自上而下”序列分析, 序列覆盖率
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